甘露糖结合凝集素与炎症因子及其相互关系对2型糖尿病及其相关血管并发症发生、发展影响的研究

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目的:本研究中分别采用了聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment lengthpolymorphism, PCR-RFLP)分析法、酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunesorbent assay,ELISA)法,检测甘露糖结合凝集素(Mannose-binding lectin,MBL)基因多态性与血清MBL浓度、并分析其变化情况与炎症因子超敏C-反应蛋白(High-sensitivity C-reactiveprotein,hs-CRP)、同型半胱氨酸(Homocysteine, Hcy)、血脂等生化指标水平,探讨上述因素与T2DM及其大血管、微血管并发症的关系,从固有免疫与炎症反应及其相关关系的角度,探讨T2DM及其相关血管并发症的可能发病机制,为T2DM及其相关大血管、微血管并发症的防治提供新思路、奠定相关理论基础。方法:1.标本收集:本研究入组对象为河北省唐山工人医院2011年3月至2012年3月住院的2型糖尿病患者共174例,收集其空腹静脉血,其中单纯T2DM患者(无糖尿病大血管、微血管并发症)58例(D1组),男性30例,女性28例,年龄36-72岁;T2DM合并糖尿病性肾病患者56例(D2组),男性29例,女性27例,年龄33-75岁;T2DM合并大血管病变患者60例(D3组),男性30例,女性30例,年龄30-80岁。并随机选取同一时期于该院体检中心健康体检者100例健康人作为对照组(H组),其中男性51例,女性49例,年龄35-75岁。2.PCR-RFLP法检测H、D1、D2及D3组中MBL基因Exon I54位密码子点突变情况,进行组间比较分析。3.ELISA法检测H、D1、D2及D3组入选者血清MBL浓度,比较组间统计学差异,分析其浓度变化与T2DM及其相关血管并发症的相关性。4.收集hs-CRP、Hcy、血脂等生化指标,比较组间统计学差异,分析上述因素与T2DM及其相关血管并发症的相关性。结果:1. PCR-RFLP分析法检测MBL基因Exon I54位密码子点突变,结果显示:MBL基因Exon I54位密码子点突变在H组、D1组、D2组及D3组4组间差异均无统计学意义(P>0.05)。2.用ELISA法检测血浆MBL水平,结果显示:H组血浆MBL水平为2.93±0.82mg/L,D1组MBL血浆水平为2.90±0.83mg/L,D2组MBL血浆水平为3.95±0.65mg/L,D3组MBL血浆水平为3.97±0.35mg/L,D1组与H组MBL血浆水平差异无统计学意义(P>0.05);D2、D3组MBL血浆水平明显高于D1组和H组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.血浆hs-CRP及Hcy水平:H组血hs-CRP水平为1.58±0.97mg/L、血Hcy水平为10.18±2.44μmmol/L, D1组血h-CRP水平为2.94±1.24mg/L、血Hcy水平为15.67±3.93μmmol/L,D2组血h-CRP水平为4.67±1.76mg/L、血Hcy水平为22.68±6.96μmmol/L,D3组血h-CRP水平为4.55±1.38mg/L、血Hcy水平为24.59±7.33μmmol/L,血h-CRP及Hcy水平在H组、D1组与D2、D3组递增,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.血浆TC、TG及LDL-C水平:H组血TC水平为4.68±0.79mmol/L、TG水平为1.57±1.17mmol/L、LDL-C水平为1.21±0.57mmol/L,D1组血TC水平为5.21±0.97mmol/L、TG水平为2.16±0.98mmol/L、LDL-C水平为3.17±0.93mmol/L,D2组血TC水平为5.86±0.97mmol/L、TG水平为2.83±1.72mmol/L、LDL-C水平为4.39±1.17mmol/L,D3组血TC水平为5.93±1.16mmol/L、TG水平为2.95±1.41mmol/L、LDL-C水平为3.68±1.04mmol/L,血TC、TG、LDL-C水平在H组、D1组与D2、D3组依次递增,差异均有统计学意义(P<0.05)。5.血浆HDL-C水平:H组血HDL-C水平为1.33±0.30mmol/L、D1组血HDL-C水平为1.11±0.27mmol/L、D2组血HDL-C水平为0.96±0.18mmol/L、D3组血HDL-C水平为0.83±0.16mmol/L,血HDL-C水平在H组、D1组与D2、D3组间依次递减,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.MBL基因Exon I54位密码子点突变频率在健康对照组、单纯T2DM组(无糖尿病大血管、微血管并发症)、T2DM合并DN组及T2DM合并大血管病变组间无差异,提示MBL基因Exon I54位密码子基因多态性可能与T2DM及其相关血管并发症无关。2.MBL血清浓度在T2DM合并血管并发症组(包括D2组和D3组)明显高于单纯T2DM组(无糖尿病大血管、微血管并发症)及健康对照组,提示:血浆MBL水平升高可能与T2DM大血管及DN的发生存在相关性,为临床上通过干预血浆MBL水平,进而延缓T2DM相关并发症的发生、发展提供了理论基础。3.血清hs-CRP、Hcy、TC、TG和LDL-C水平在T2DM患者中升高,其中在合并糖尿病肾病及糖尿病相关性大血管并发症患者中,升高更为显著,提示上述因素可能是T2DM及其大血管、微血管病变的危险因子;血HDL-C水平在T2DM患者中降低,其中合并大血管并发症及糖尿病肾病患者中降低更为显著,提示HDL-C可能为T2DM及其大血管、微血管病变的保护因子,为临床多因素同时干预有效预防、延缓糖尿病及其相关血管并发症的发生、发展提供理论基础。
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