石油烃代谢菌分泌绿脓菌素对其降解过程的影响作用研究

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自然界中许多微生物可产绿脓菌素,该化合物是一种氧化还原物质,在生物体内可产生强氧化剂。绿脓菌素在其分泌菌降解石油烃过程中的作用未见报道。由于铜绿假单胞菌能快速降解石油烃,也可高产绿脓菌素,研究绿脓菌素在铜绿假单胞菌降解石油烃过程中的作用具有重要的意义。论文中使用产绿脓菌素阳性的野生株NY3菌和NX菌,以及相应的阴性突变株NY3-1和NX-I,均为铜绿假单胞菌。本文首先研究光化学和生物法合成绿脓菌素的特性,利用光化学合成的绿脓菌素,在合适的条件下降解烃,试图说明绿脓菌素参与烃类的降解过程。并研究了绿脓菌素阳性和相应的绿脓菌素阴性突变菌株在降解石油烃过程中的差异性,以说明分泌绿脓菌素对菌体降解石油烃能力有影响作用。通过研究获得以下研究成果:(1)绿脓菌素可通过绿脓杆菌生物和吩嗪硫酸甲酯光化学等两种方法合成,且两种途径合成的绿脓菌素结构基本相同。在十六烷、光化学合成的绿脓菌素、氧气、亚铁离子及NADH等存在下,反应60min十六烷去除率19.08%。光化学合成绿脓菌素、辅酶NADH、菲共存时,反应20h,初步鉴定出单羟基和双羟基菲的氧化产物中间。(2)产绿脓菌素阳性菌NY3比相应阴性突变株NY3-1代谢烃的效率高。以十六烷为唯一碳源,生长95h阳性菌生物量OD600nm=3.192,阴性菌仅OD600nm=0.272,对十六烷同步降解率比阴性菌提高了24.8%;以柴油为碳源时,100h阳性菌生长量OD600nm=3.228,阴性菌仅为1.094,对柴油中烃的同步平均降解率比阴性菌提高9.7%;对于更难降解的蜡质原油,阳性菌NY3仍比阴性菌NY3-1生长快,100h对蜡质原油降解率比阴性菌提高9.12%。产绿脓菌素的阳性菌NX与其相应的阴性突变株NX-I的也获得了同样的结果,50h阳性菌NX对柴油中烷烃的平均降解率比阴性突变株高20.8%。对于蜡质中烷烃平均降解率比阴性突变株提高22.21%。(3)产绿脓菌素NY3和NX和相应的阴性突变株NY3-1和NX-I菌在以烃类物质为碳源生长代谢过程中均产酸,且生长速度越快产酸量越大。阳性菌产酸效率明显高于阴性突变株。
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