前列腺癌是我国近年来发病率增长最快的男性泌尿生殖系统肿瘤。晚期前列腺癌的治疗以雄激素剥夺治疗为主,但经过一段时间治疗后会进入去势抵抗阶段,去势抵抗性前列腺癌的治疗更为困难,关于去势抵抗的发生机制仍有待进一步研究。除了雄激素受体途径外,有研究证据显示Wnt/β-catenin通路及PI3K/AKT/m TOR通路的激活与去势抵抗的发生有关。这两个通路的抑制剂被认为有治疗去势抵抗性前列腺癌的潜质。环状RNA是一类以共价键形成环形结构的RNA分子,广泛参与生理和病理进程,在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。cir-ITCH是一个研究比较多的环状RNA,现有研究表明其在结肠癌、肺癌、食道癌、膀胱癌中均发挥重要的抑癌作用,研究结果提示cir-ITCH可以通过海绵吸附不同的mi RNA而抑制Wnt/β-catenin通路。但其在前列腺癌中的作用尚未明确,本研究计划探究cir-ITCH在前列腺癌,特别是去势抵抗性前列腺癌中的作用。本研究分为三部分,第一部分是检测前列腺癌组织、癌旁组织、前列腺癌细胞及正常前列腺上皮细胞中cir-ITCH的表达情况。第二部分是通过体外实验验证cir-ITCH和mi R-17的相互作用。第三部分是通过转染过表达cir-ITCH和mi R-17,观察过表达cir-ITCH对不同前列腺癌细胞（雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P,去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3）的增殖、迁移及侵袭能力的影响。用western blot方法检测转染cir-ITCH后的前列腺癌细胞中Wnt/β-catenin通路及PI3K/AKT/m TOR通路代表蛋白的表达水平,以及外源性雄激素或雄激素受体拮抗剂对表达水平的影响,探讨可能的作用机制。第一部分环状RNA cir-ITCH在前列腺癌组织及细胞中的表达目的:检测前列腺癌组织、癌旁组织、不同前列腺癌细胞（LNCa P、PC-3）及正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）中cir-ITCH的表达情况。方法:用q RT-PCR的方法检测10对2018年1月至12月期间手术切除的前列腺癌组织及癌旁组织、雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P、去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3及正常前列腺上皮细胞RWPE-1中的cir-ITCH表达水平。结果:cir-ITCH在癌旁组织及前列腺癌组织中的相对表达量分别为4.04±0.22、1.28±0.06,前列腺癌组织中的表达水平明显降低（P<0.001）。RWPE-1细胞、LNCa P细胞、PC-3细胞中cir-ITCH的相对表达量分别为1.0±0.04、0.52±0.04、0.48±0.03。前列腺癌细胞中的表达水平明显低于正常前列腺上皮细胞（P<0.05）,两种前列腺癌细胞中的表达水平无显著性差异（ns,no significance）。小结:cir-ITCH在前列腺癌组织及细胞中的表达显著下降,在雄激素依赖性前列腺癌细胞及去势抵抗性前列腺癌细胞中的表达无显著性差异。第二部分环状RNA cir-ITCH与mi R-17在前列腺癌细胞中的相互作用研究目的:验证环状RNA cir-ITCH与mi R-17在前列腺癌细胞中的相互关系。方法:将LNCa P细胞、PC-3细胞分别做GFP转染、cir-ITCH转染、mi R-17转染、cir-ITCH和mi R-17双转染处理,用q RT-PCR的方法检测转染后的细胞中cir-ITCH和mi R-17的表达水平。结果:转染cir-ITCH后,LNCa P细胞、PC-3细胞中的mi R-17表达水平较对照组显著降低,共转染cir-ITCH可以显著抵消转染mi R-17导致的表达水平升高。转染mi R-17后,LNCa P细胞、PC-3细胞中的cir-ITCH表达水平显著降低,共转染mi R-17也可以显著抵消转染cir-ITCH导致的表达水平升高。小结:在雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P及去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3中,cir-ITCH与mi R-17相互抑制对方的表达水平。第三部分环状RNA cir-ITCH对雄激素依赖性和去势抵抗性前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其作用机制研究目的:研究cir-ITCH对LNCa P细胞和PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及作用机制。方法:分别对LNCa P细胞和PC-3细胞进行GFP转染、cir-ITCH转染、mi R-17转染、cir-ITCH和mi R-17双转染,用CCK-8方法检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell试验检测细胞的侵袭能力。用western blot方法检测不同处理方法（转染GFP,转染cir-ITCH,转染cir-ITCH+双氢睾酮,转染cir-ITCH+比卡鲁胺）处理后的前列腺癌细胞中雄激素受体、β-catenin、AKT、p-AKT、m TOR及p-m TOR的表达水平。结果:1.过表达cir-ITCH可以显著抑制LNCa P及PC-3细胞的增殖、迁移及侵袭能力;mi R-17可以促进两种细胞的增殖、迁移及侵袭能力。2.在LNCa P细胞,过表达cir-ITCH可以下调AR,β-catenin,p-AKT,p-m TOR的表达,双氢睾酮可以对抗这种抑制作用,比卡鲁胺可以强化这种抑制作用。在PC-3细胞,无AR表达,过表达cir-ITCH可以下调β-catenin,p-AKT,p-m TOR的表达水平,双氢睾酮和比卡鲁胺对这种抑制作用均无明显影响。小结:过表达cir-ITCH对雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P及去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3均具有抑制增殖、迁移及侵袭的作用,其作用机制可能是通过抑制mi R-17,进而调节Wnt/β-catenin通路及PI3K/AKT/m TOR通路,这种抑制作用不依赖雄激素受体,因此,cir-ITCH可能具有治疗去势抵抗性前列腺癌的潜在价值。结论cir-ITCH在前列腺癌组织及细胞中的表达水平较癌旁组织及正常前列腺上皮细胞中的表达水平显著下降。在雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P及去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3中,cir-ITCH与mi R-17互相抑制对方的表达水平。cir-ITCH对雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P及去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3具有抑制增殖、迁移及侵袭的作用,过表达cir-ITCH可以明显抑制β-catenin,p-AKT,and p-m TOR的表达,其作用机制可能是通过抑制mi R-17,进而调节Wnt/β-catenin通路及PI3K/AKT/m TOR通路,且这种抑制作用不依赖雄激素受体。