【摘 要】
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羊伪结核（Goat pseudotuberculosis）又称羊干酪性淋巴结炎（Caseous lymphadenitis,CLA）,可导致山羊浅表淋巴结、内脏淋巴结和内脏器官中形成化脓性脓肿,病羊迅速消瘦、产奶量下降、皮毛利用和胴体肉用率降低,且容易在畜群间传播,严重制约着奶山羊产业的发展。目前对于该病没有疗效确实的治疗手段和切实可行的免疫计划。因此患病动物快速检测从大群中隔离成为预防该病的主要
【基金项目】
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国家绒毛用羊产业技术体系项目（编号:CARS-39-14）； 陕西省农业专项资金支持科技创新驱动项目（编号:K3360218035）； 陕西省重点研发计划重点项目（编号:2021NY-024）计划；
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羊伪结核（Goat pseudotuberculosis）又称羊干酪性淋巴结炎（Caseous lymphadenitis,CLA）,可导致山羊浅表淋巴结、内脏淋巴结和内脏器官中形成化脓性脓肿,病羊迅速消瘦、产奶量下降、皮毛利用和胴体肉用率降低,且容易在畜群间传播,严重制约着奶山羊产业的发展。目前对于该病没有疗效确实的治疗手段和切实可行的免疫计划。因此患病动物快速检测从大群中隔离成为预防该病的主要措施,建立检测羊伪结核抗体诊断方法很有必要。本试验对疑似患病羊只体表淋巴结脓包内容物采样对病原菌分离鉴定;用热灭活处理的菌悬液为包被抗原,建立了山羊伪结核棒状杆菌抗体间接ELISA检测方法;并应用于陕西关中地区山羊伪结核棒状杆菌的血清学调查。研究获得以下结果:1.经分离纯化得到1株革兰阳性菌,镜下呈球棒状,37℃条件下该菌在血清肉汤固体培养基上生长良好,可观察到直径约为1～2 mm的圆形、干燥、易推动、不透明呈灰白色的菌落。在血清肉汤液体培养基培养,生长为具有表面薄膜的粒状,沉积于锥形瓶底部。16S r RNA PCR测序鉴定结果、特异性基因PCR鉴定结果,确定为伪结核棒状杆菌。分离株接种奶山羊,注射部位形成脓肿破溃;耐药性试验结果显示,该菌对四环素、新霉素、环丙沙星、复方磺胺甲恶唑等多种抗生素敏感,对链霉素低度敏感,仅对阿米卡星耐药性。2.建立的间接ELISA结果显示,最佳抗原包被量为OD600nm=0.084的菌悬液100μL,5%BSA封闭时间2 h,一抗血清稀释度为1:400,酶标记二抗的稀释度为1:5 000,血清阴阳性的OD450nm临界值为0.352。该方法仅对羊伪结核阳性血清呈特异性反应,其他6种常见山羊疾病阳性血清无交叉反应无假阳性出现,特异性较强。批内试验和批间试验的变异系数均小于9.5%,重复性较好。敏感性试验表明,当羊伪结核阳性血清做1:1 280稀释时检测结果仍超过临界值,敏感性较强。3.陕西关中地区:富平、蒲城、陇县、泾阳、蓝田,山羊伪结核棒状杆菌抗体阳性率分别为:36.9%、45.6%、33.3%、30.9%、35.2%,山羊伪结核抗体阳性率在关中无地区差异性。山羊伪结核棒状杆菌抗体阳性率与患病动物不同年龄性别差异极显著（P<0.01）,与不同养殖规模有显著差异（P<0.05）,抗体阳性率成年羊只大于未成年羊只,雌性动物大于雄性动物。随着养殖规模增加患病呈上升趋势,中大型养殖场患病率最高。
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