【摘 要】
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该研究的主要内容是对Osrab5B基因的物理图进行了一些探讨,同时在功能研究方面进行了瞬时表达实验及以Osrab5B的反义DNA转化烟草的研究.为了进一步证实Osrab5B是定位在BAC200
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该研究的主要内容是对Osrab5B基因的物理图进行了一些探讨,同时在功能研究方面进行了瞬时表达实验及以Osrab5B的反义DNA转化烟草的研究.为了进一步证实Osrab5B是定位在BAC200上的该文以Osrab5B cDNA为探针和BAC200杂交并同时采用了PCR的方法做了进一步的确证工作,证明了它的确是位于BAC200上.为了验证小G蛋白基序MXXXS的膜定位功能和检测Osrab5B蛋白在亚细胞水平上的定位,该文构建了瞬时表达载体.选通过两步PCR法扩增得到了Osrab5B cDNA和绿色荧光蛋白基因mGFP4的融合片段.将其亚克隆至表达载体的CaMV35S启动子下游,用基因枪导入到洋葱内表皮细胞.暗培养后,在荧光显微镜下观察Rab5B的定位情况.荧光主要集中在细胞核表面,至16hrs时逐渐增多,19-20 hrs时最多.该文同时利用Osrab5B 反义DNA进行转化烟草的研究.
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