【摘 要】
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自2013年上海首次发生H7N9流感病毒感染人的案例后,安徽、江苏等也先后出现,家禽中也发生H7N9亚型禽流感疫情案例,对养殖业带来损失的同时,也给全球公共卫生带了前所未有的挑战。已被证实流感病毒某些基因上氨基酸的突变可以导致其传播并感染人类,但环境源的流感病毒研究报道较少。因此,本研究对2019年河北省一株环境源甲型H7N9亚型流感病毒进行了同源性、氨基酸突变以及遗传进化分析,同时为了探究分离株
【基金项目】
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河北省重点研发计划项目（20326622D）； 流感病毒变异变迁追踪及有效防控研究（2020ZX09001016-003）；
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自2013年上海首次发生H7N9流感病毒感染人的案例后,安徽、江苏等也先后出现,家禽中也发生H7N9亚型禽流感疫情案例,对养殖业带来损失的同时,也给全球公共卫生带了前所未有的挑战。已被证实流感病毒某些基因上氨基酸的突变可以导致其传播并感染人类,但环境源的流感病毒研究报道较少。因此,本研究对2019年河北省一株环境源甲型H7N9亚型流感病毒进行了同源性、氨基酸突变以及遗传进化分析,同时为了探究分离株对哺乳动物的致病性和跨物种传播风险,通过鼠肺-肺传代的方式构建了鼠适应毒株（简称MA-P5）,主要研究内容如下:1.从2019年河北省某活禽交易市场采集的环境拭子中分离得到一株A型H7N9流感病毒并命名为 A/Environment/Hebei/621/2019（H7N9）（简称 EN621 或 WT）,对该分离株的8个基因片段进行了扩增和测序、同源性、遗传进化分析和重要氨基酸位点分析,结果显示PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS基因片段的核苷酸同源性最高毒株均为禽源H7N9亚型流感毒株,8个基因均属于欧亚谱系,与人源H7N9流感毒株相对应基因高度同源。2.WT和MA-P5受体结合能力试验显示,WT和MA-P5分别具有与α-2,3唾液酸受体和α-2,6唾液酸受体结合能力,这意味着WT和MA-P5适应株不仅可以感染禽类,还可能感染人。3.小鼠致病性试验结果显示,WT毒株感染小鼠后体重变化以及死亡率均低于MA-P5感染小鼠后的体重变化和死亡率,表明MA-P5毒株对哺乳动物的致病性强。血清学结果显示MA-P5毒株感染小鼠后体内并未产生抗体,而WT毒株感染小鼠后可在体内测出H7亚型流感病毒抗体。4.豚鼠间传播能力试验表明,WT和MA-P5均可通过直接接触传播,但在气溶胶传播能力研究中发现,MA-P5传播能力强于WT,表明MA-P5具有一定的跨物种传播的能力。通过对WT和MA-P5的全基因组氨基酸序列对比发现,MA-P5的PB2（E 627K）和PB1（H115Q）的氨基酸位点发生了突变,表明这两个氨基酸位点突变与其致病性和传播能力有密切关系。本研究通过对1株环境源H7N9流感病毒进行了遗传进化,氨基酸位点分析,受体结合特性、致病性、跨物种传播风险等研究。结果显示该分离株和鼠适应株在哺乳动物间有一定的跨物种传播风险,提醒应加强对H7N9流感病毒的PB2和PB1基因监测,为H7N9流感的防控提供了理论依据。
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