【摘 要】
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目的:通过检测过表达ABCG2的细胞模型砷耐受性的改变,初步探讨ABCG2与抗砷性产生关系。方法:(1)免疫荧光化学方法检测ChAsE-BMSCs、膀胱癌抗砷细胞以及23例急性白血病患者骨
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目的:通过检测过表达ABCG2的细胞模型砷耐受性的改变,初步探讨ABCG2与抗砷性产生关系。方法:(1)免疫荧光化学方法检测ChAsE-BMSCs、膀胱癌抗砷细胞以及23例急性白血病患者骨髓内ABCG2的表达情况;(2)真核表达载体pEGFP-C1-ABCG2经转化、筛选、测序鉴定后,抽提并获取高纯度的重组质粒,采用脂质体介导转染法转染至293T细胞,western-blot鉴定转染效果(3)台盼兰计数方法检测ABCG2过表达对293T细胞增殖的影响(4)细胞毒性实验检测ABCG2过表达细胞对砷剂耐受性的改变。结果: (1)免疫荧光方法检测两种抗砷细胞中ABCG2蛋白表达均低于对照组细胞;(2)免疫荧光方法检测23例急性白血病患者ABCG2蛋白表达强度,从低到高依次为:正常对照组、初发组和复发组,三者之间差异有统计学意义(P<0.0001)(3)激光共聚焦显微镜观察和Western-blot结果证明转染成功;(4)ABCG2过表达降低细胞的增殖能力;(5)ABCG2过表达细胞对砷剂耐受性下降。结论: (1)抗砷细胞内ABCG2蛋白表达下调,细胞抗砷性与ABCG2表达呈负相关;(2)ABCG2高表达是急性白血病患者不利的预后因素;(3)成功建立过表达ABCG2基因的细胞模型;
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