冠心宁注射液的抗肿瘤作用及其分子机制研究

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目的:研究冠心宁注射液对食管癌细胞KYSE150、乳腺癌细胞MDA-MB-231以及肝癌细胞Hep G2的增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探讨其作用机制,为抗肿瘤药物的研发提供新思路。方法:体外培养人食管癌细胞KYSE150,人乳腺癌细胞MDA-MB-231以及人肝癌细胞Hep G2,采用不同浓度的冠心宁注射液处理三种肿瘤细胞。MTT法以参麦注射液为阳性对照药物检测冠心宁注射液对细胞生长的影响;Ed U法检测冠心宁注射液对细胞增殖的影响;细胞划痕实验、Transwell实验检测冠心宁注射液对细胞迁移及侵袭能力的影响;流式细胞术检测冠心宁注射液对细胞凋亡的影响;Western blot法检测冠心宁注射液对三种肿瘤细胞中JNK,Ras/Raf/ERK信号通路中相关蛋白表达水平的影响;建立小鼠H22肝肿瘤模型,检测冠心宁注射液对小鼠体内实体瘤生长的影响。结果:1.冠心宁注射液可呈剂量依赖性地抑制人食管癌细胞KYSE150、人乳腺癌细胞MDA-MB-231以及人肝癌细胞Hep G2的增殖、迁移以及侵袭。2.冠心宁注射液在20μL/m L浓度下可诱导KYSE150细胞的凋亡、在50μL/m L浓度下可明显诱导MDA-MB-231和Hep G2细胞的凋亡。3.冠心宁注射液可在KYSE150细胞中下调p-JNK蛋白的表达,对MDA-MB-231和Hep G2细胞中的p-JNK抑制作用不显著,但可在这两种细胞中上调Bax,下调Bcl-2蛋白的表达。4.冠心宁注射液可在三种肿瘤细胞中抑制Ras、Raf以及p-ERK的表达。5.冠心宁注射液可体内抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。结论:1.冠心宁注射液在体内外均具有抗肿瘤活性。2.冠心宁注射液可能在食管癌细胞中,通过JNK通路抑制细胞增殖,通过Ras/Raf/ERK通路抑制细胞增殖、迁移及侵袭。3.冠心宁注射液可能在乳腺癌以及肝癌细胞中,通过Bax/Bcl-2通路诱导细胞凋亡,并通过Ras/Raf/ERK通路抑制细胞增殖、迁移以及侵袭。
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