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一、银屑病患者的FLG基因突变筛查银屑病(Psoriasis, PS, OMIM 177900)是一种常见的慢性炎症性皮肤病,临床特征为皮肤上出现红斑,并覆有银白色鳞屑,可累及皮肤任何部位,好发于头皮、躯干及四肢伸侧。病理特征为角质增厚或角化不全、颗粒层变薄或消失、棘层增厚；细胞间隙增宽,炎症细胞向表皮和真皮浸润。银屑病在世界范围内发病率约为0.6-4.8%；据估计我国银屑病患者已接近1,000万。银屑病多发病于15岁至30岁之间,常伴随患者一生。银屑病被认为是一种多基因遗传病,其发病机制复杂、至今尚未完全阐明。各种遗传或环境因素主要通过影响免疫系统、炎症反应通路或表皮功能而致病,吸烟、饮酒、精神紧张和物理损伤等其他原因也是常见促发因素。FLG(filaggrin)基因,位于1q21.3,编码丝聚蛋白(filaggrin, Filament Aggregating Protein)的无活性不溶性前体丝聚蛋白原(profilaggrin)。丝聚蛋白是透明角质颗粒(Keratohyalin Granules,KHG)中的主要成份。丝聚蛋白的终产物在皮肤表面形成保湿因子。FLG基因的突变可导致表皮角化异常,从而引发相关皮肤病。FLG基因最早被证明是寻常性鱼鳞病的致病基因,最近又有报导FLG基因的突变也会导致特异性皮炎的发生。免疫组化的结果显示银屑病患者的表皮颗粒层中丝聚蛋白明显减少,提示FLG基因可能参与了银屑病的发生。在本研究中,我们收集了2个中国汉族银屑病／鱼鳞病家系,328例中国汉族散发银屑病患者和500例正常对照,采用长片断PCR扩增和直接测序的方法分析患者与正常人的FLG基因序列,寻找与银屑病相关的突变。我们在家系1中检测到FLG基因的无义突变K4022X,其中先证者携带有纯合突变K4022X,鱼鳞病患者(Ⅰ：4,Ⅱ：6)携带有杂合突变K4022X,另有4个表型正常个体(Ⅰ：2,Ⅱ：1,Ⅱ：4,Ⅱ：5)携带有杂合突变K4022X。在328例散发病人中检测到2个纯合突变K4022X,22个杂合突变K4022X。在500例正常对照中检测到15个杂合突变K4022X。等位基因频率(χ2=12.56,P<0.005)；基因型频率(χ2=16.76,P＜0.005)。Logistic回归中,OR=2.855,95%CIs=2.275-9.974。家系2中我们没有检测到FLG基因的任何突变。上述研究提示,FLG基因的无义突变K4022X导致银屑病家系1银屑病的发生。银屑病家系2可能存在其它未知基因的突变。FLG基因的K4022X突变在中国汉族人群中的等位基因频率为1.5%,可能是一种皮肤角化异常有关的常见突变。二、孤独症患者的NLGN3/4/Y基因的突变筛查孤独症(Autism, OMIM 209850),又称为自闭症,是一种严重的儿童精神发育障碍疾病。通常起病于3岁之前,目前国外报道儿童孤独症的患病率为6%0,国内报道学龄前儿童患病率为1‰,美国约为4-10万,欧洲约10万,中国约2.8-10万男女患病率之比为4：1。主要临床表现为不同程度的社会交往能力缺陷、语言交流技巧障碍、重复刻板的动作和兴趣狭窄等。孤独症的发病机制至今尚未阐明,已有研究表明,孤独症属于复杂性疾病,且遗传度较高。细胞遗传学研究、同胞、家系研究以及病例对照关联分析、全基因组关联分析等研究已经发现了很多与孤独症相关的位点,克隆了多个易感基因。研究表明,神经突触异常可能会导致孤独症的发生。NLGN家族属于突触后细胞粘附分子,通过与突触前细胞粘附因子α-neurexin或β-neurexin形成异四聚体,调控神经元的突触兴奋或突触抑制。NLGN家族共包括5个成员：NLGN1 (3q26.31), NLGN2 (17p13.1), NLGN3 (Xq13.1), NLGN4 (Xp22.3)和NLGNY (Yq11.221)。已有研究发现,NLGN3/4/Y的突变可导致孤独症的发生,但在中国人群中还没有NLGN家族基因与孤独症的相关研究。在本研究中,我们收集了中国汉族人群318例散发孤独症患者及278例正常对照,采用PCR扩增和直接测序的方法分析患者的NLGN3/4/Y基因序列,确定中国孤独症患者的NLGN3/4/Y基因突变。318例散发孤独症患者中我们检测到NLGN3基因的1个同义突变c.1638G>A和1个错义突变G406S以及NLGN4基因的1个同义突变c.1194C>T和3个错义突变G84R、Q162K、A283T。在278例正常对照中没有发现这6个突变。NLGN3/4的同义突变c.1638G>A(NLN3)、c.1194C＞T(NLGN4)和错义突变G406S (NLGN3)、G84R (NLGN4)、Q162K (NLGN4)、A283T (NLGN4)有可能会导致孤独症的发生；NLGN3/4基因的突变在不同人群中都可导致孤独症的发生；其他孤独症患者可能存在其它基因的突变。