苏云金芽孢杆菌对三苯基锡的降解及菌体特性变化

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三苯基锡(TPh T)对生物具有多种毒性,由于用途广泛,它已经污染了全球环境。本论文在考察苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)吸附降解TPh T的基础上,还研究了降解过程中菌体活性、阴阳离子释放和微观形态的变化,并根据苯基锡(Ph Ts)的分子特性,结合降解菌的全基因,对TPh T的降解基因进行了初步推测,为阐明TPh T的降解机制和微生物降解法的实际应用提供了实验数据。B.thuringiensis可将TPh T降解为二苯基锡(DPh T)、一苯基锡(MPh T)和无机锡,在无机盐体系中,对1 mg·L-1 TPh T的降解率在2 d和7 d时分别为64.4%和82.3%。降解TPh T的同时,B.thuringiensis还可以去除体系中部分共存金属离子,存在10 mg·L-1 Mg2+时,TPh T降解率在2 d时达到80.6%。菌体细胞膜通透性、菌体存活率和蛋白含量都与TPh T的降解显著相关,Cl-浓度变化可以作为菌体细胞膜通透性改变的指标。TPh T的暴露增大了B.thuringiensis细胞膜通透性,降低了菌体蛋白含量,造成部分菌体发生死亡,体内芽孢、伴孢晶体、部分有阴阳离子等物质流出。但多数菌体饱满且具有活性,完整的细胞结构维持了菌体的正常代谢和降解TPh T的能力,Na+/K+-和Ca2+/Mg2+-ATP酶参与了TPh T的降解,促进了菌体对K+和PO43-的吸收。全基因测序及基因注释的结果显示,B.thuringiensis内含有可以编码多种加氧酶和脱氢酶的基因,这两类酶已被证明参与了芳香族化合物中芳香环的裂解开环过程。根据三种Ph Ts的分子性质和降解后的浓度,分析TPh T的降解可能是由加氧酶和脱氢酶催化各苯环直接裂解开环引起的,几个苯环的裂解既可同时发生,也可相继发生,其中加氧酶最先发挥了对苯环的催化作用。B.thuringiensis能表达的细胞色素P450(CYP450)作为一种对污染物具有广谱解毒作用的加氧酶,在降解TPh T过程中可能发挥了重要作用。
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