目的:建立兔vx2转移瘤模型,使用DSA及CT等影像设备,通过腹腔动脉造影、肝固有动脉造影、CT灌注成像探讨肝转移瘤的血液供应。通过观察、分析TACE前后门静脉的影像学表现,研究TACE对兔肝vx2转移瘤模型门脉血流动力学改变情况,以明确在TACE前后门静脉是否参与转移瘤供血。　　 方法:　　 1.试验动物模型建立　　 1.1 vx2细胞株制备将vx2瘤细胞接种于新西兰大白兔后腿上段外侧肌肉,2周左右接种处可扪及一2cm×2cm实质性包块。由耳缘静脉迅速注入40mL空气处死兔子。无菌条件下剥离肿瘤包块,切取边缘生长旺盛的鱼肉样组织置于盛有生理盐水的平皿中,用眼科剪剔除豆腐渣样坏死组织和结缔组织。瘤组织制成细胞悬液。　　 1.2 vx2瘤细胞悬液的制备在超净台上,将新鲜鱼肉样癌组织在生理盐水内用眼科剪剪碎,反复吹打,经200目滤网筛过滤制成瘤细胞悬液,离心(1000 r/min)5 min,台盼蓝染色后活细胞计数,调整细胞密度为1×106/ml。　　 1.3 肝vx2转移瘤模型的建立:实验动物术前禁食12h,用1％戊巴比妥钠3ml/kg耳缘静脉注射全麻,取仰卧位,固定四肢于手术台上,上腹部备皮,常规消毒铺巾,于剑突下2cm正中开腹约2-3cm长,暴露肝左叶,缓慢注入vx2细胞悬液0.3ml,注射完毕后快速拔针,在穿刺点处附上一小块无菌明胶海绵块压迫止血。确认无出血及瘤细胞溢出后还纳肝脏,逐层缝合。术后青霉素40万u静脉缓慢推注,1次/日,连续3 d。　　 2.实验对象的选择分别在种植后14天对肝vx2瘤灶行CT平扫加灌注扫描。肝脏平扫,扫描参数:80kV,200mA,FOV14,层厚2.5mm,螺距0.969；灌注扫描采用高压团注方式,造影剂碘海醇(320mg/ml)1ml/kg,速度为1 ml/s,延迟5s扫描,共扫描30S。在CT检查明确为肝脏移植瘤的兔子中,选择瘤灶体积大约为1.5-2.5cm门静脉显示清晰的10只兔子作为研究对象,符合率47.6％,其余11只种植成功的兔子中门静脉显示不清的2例,瘤灶体积过大的5例(直径大于3.5cm)瘤灶体积过小的4例(直径小于1cm)。符合试验条件的兔子在种植后第15天进行介入治疗。　　 3.介入治疗　　 介入治疗选用的数字减影血管造影机为SIEMENS ANGIOSTARPlus。实验兔麻醉、固定后,腹股沟区常规消毒铺巾。在右侧腹股沟区域股动脉搏动最强处沿股骨走形纵行切开皮肤,暴露股血管鞘,分离出股动脉长约2cm,用TERUMO公司生产的5F导管鞘内的穿刺套管针(18G)穿刺入股动脉,退出针芯,在鞘尾端迅速拧上Y阀防止出血,跟入TERUMOPROGREAT微导管及导丝,透视下寻找腹腔动脉。行腹腔动脉造影,对比剂应用碘的质量浓度为370m g/ml的优维显,延时注射1 s,采集速率3帧/秒。注射速率1ml/秒,注射剂量为6ml。注意观察门静脉显示情况。后超选择至肝固有动脉,行肝固有动脉造影注射剂量为3ml,注射速率0.5ml/秒.再超超选至瘤灶供血动脉进行栓塞治疗。碘油使用最大剂量1.5ml,实际使用剂量以透视下碘油无反流为注射标准。　　 4.CT检查　　 所有进行介入栓塞治疗的兔子均于vx2瘤株种植后两周和介入栓塞术后及介入治疗术后10-14天进行螺旋CT平扫以及灌注扫描。检查采用美国GE公司Light Speed Pro32层螺旋CT机。由于介入栓塞后即时CT扫描肿瘤区域碘油沉积对门静脉的显示有较大影响,门静脉显示不清。选取种植后两周和介入术后10-14天的CT灌注图像作为此次试验的分析对象。　　 5.CT及DSA图像处理方法分别选取进行介入栓塞治疗的兔子的vx2瘤株种植术后两周和介入术后10-14天的CT灌注图像,在灌注图像中分别选择肿瘤中心区,正常肝实质区和门静脉区将选好兴趣区的CT图像传送至CT工作站,应用去卷积灌注软件获得肿瘤中心、门静脉和正常肝实质兴趣区时间密度曲线(TDC)；选择肿瘤兴趣区时要避开大血管。选取腹腔动脉造影门静脉期序列图像,每秒选择一幅图像,将DSA图像传输至PC工作站,用SIEMENS专用Quantcor Lva软件将DICOM图像转换为TIF格式。再用PhotoShop进行定量分析。分别测量转移瘤中心区域、门静脉和肿瘤周边正常肝实质灰度(K值,间接代表密度),并画出时间密度曲线(TDC)。其方法是:用PhotoShop.cs打开图像文件,在菜单栏中选取窗口,点击下拉菜单中导航器,选取信息,在K:区域点击跟踪实际颜色值小图标,在下拉菜单中选取灰度,用工具栏中的吸管工具,读取兴趣区K值百分数。纯白区域为0％,纯黑区域为100％。　　 6.病理检查　　 进行介入治疗的兔子在其死亡后均剖腹探查,vx2肝癌是突出于肝表面结节样的包块,质地较硬,与正常肝组织分界不清,部分表面具有光泽,呈鱼肉样(图1)。病理切片检查显示其病理类型为鳞癌(图2)。　　 7.统计学方法　　 采用SPSS13.0统计软件进行分析,对栓塞前后灌注CT门静脉峰值时间及门静脉峰值(HU)采用配对t检验进行统计分析,p<0.05为差异有统计学意义。　　 结果:　　 1.DSA表现腹腔动脉造影时肝固有动脉显示清晰,门静脉显示清晰,肿瘤呈环形强化或片状影。腹腔动脉造影动脉期为1-7s,门静脉显影时间为7-21s,从栓塞前腹腔动脉造影静脉期TDC中可以看出门静脉的密度(k值)峰值为41％～58％平均为(53.35±9.28)％,正常肝实质密度(K值)峰值31％～45％,平均为(38.17±4.26)％肿瘤中心密度(K值)峰值为37～50平均为(45.13±3.03.)％。肿瘤中心密度表现为缓慢下降的趋势,而正常肝实质密度则呈现持续缓慢上升的态势,在14s以后,肿瘤中心的密度小于正常肝实质的密度。而门静脉表现为先是缓慢上升的平台,然后在10s后表现为快速上升期。此时门静脉密度大于肿瘤中心区的密度。栓塞后腹腔动脉造影门脉期TDC表现同栓塞前无明显变化(肿瘤中心密度(K值)峰值为24～41平均为(36.39±1.87)密度值与栓塞前相比有所下降主要受碘油沉积影响)。　　 2.CT表现vx2瘤株种植两周后CT平扫时肿瘤多呈等或低密度区,灌注扫描时动脉期表现为不均匀强化。静脉期表现为瘤灶边缘环形强化范围扩大,所有CT扫描门静脉均显示良好。介入栓塞后即刻CT扫描由于肿瘤组织碘油沉积的影响门静脉显示不清无法测量其时间密度曲线。介入栓塞术后10-14天行CT平扫加灌注扫描,肿瘤区域仍有少量碘油沉积,动脉期表现为环形强化,门脉期时由于碘油大部被吸收门静脉显示受碘油影响较小,可显示清晰。通过去卷积灌注软件获得栓塞前后门静脉、肿瘤中心、正常肝实质时间密度曲线。从栓塞前TDC中可得到门静脉密度(HU)峰值为115-160平均为143,肿瘤中心密度(HU)峰值为68-92平均为76,正常肝实质密度(HU)峰值为83-121平均为106。从TDC中可以看出门静脉表现为快速上升态势,正常肝实质表现为缓慢上升,而肿瘤中心表现为缓慢下降或平台期。介入栓塞后TDC与栓塞前TDC相比无明显变化(肿瘤中心密度(HU)峰值为89-141平均为118,密度与栓塞前相比有所上升主要受碘油沉积影响)。　　 3.统计学分析:通过对栓塞前后门静脉峰值(HU)进行t检验得出t=0.885 p=0.399(P>0.05)无统计学意义。通过对门静脉峰值时间进行t检验得出t=0.287,P=0.78(P>0.05)无统计学意义。　　 结论:　　 1.CI、灌注扫描时门静脉显示清晰,选取vx2瘤株种植术后两周和介入术后10-14天的CT灌注图像,应用去卷积灌注软件进行分析。可得出肿瘤中心区密度不随门静脉密度的变化而变化,门静脉在介入栓塞后仍不参与转移瘤的供血。　　 2.DSA腹腔动脉造影时,门静脉显示清晰,选取静脉期序列造影图像,通过PhotoShop软件进行定量分析。通过TDC可以看出肿瘤栓塞前在静脉期序列中门静脉在1—6s时表现为高速上升态势,在7-13秒表现为缓慢下降。正常肝实质在静脉期表现为缓慢上升,肿瘤中心区表现为缓慢下降或平台期。在肿瘤栓塞后由于碘油沉积的影响肿瘤中心区平均密度值大幅下降,但从时间密度曲线中仍然可以看出随着时间变化其密度无明显变化仍呈现为平台期。而门静脉表现同栓塞前无明显变化,所以在肿瘤栓塞后门静脉仍不参与肿瘤组织供血。　　 3.通过对栓塞前后门静脉峰值(HU)及门静脉峰值时间(s)的对照分析,经统计学检验无显著性差异(p>0.05)。证明门静脉在肿瘤栓塞后血流动力学无明显改变。