葵花籽粕中绿原酸和蛋白酶解肽的制备及生物活性研究

被引量 : 33次 | 上传用户:landy_st
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
葵花籽榨取油脂后的籽粕中含有丰富的绿原酸和蛋白质。绿原酸是一种非常好的抗氧化剂,葵花籽粕蛋白因其氨基酸含量丰富且平衡良好、生物利用率高和无抗营养因子而被作为植物蛋白的重要来源,也是获得生物活性肽的很好资源。目前,对葵花籽粕中绿原酸和蛋白质、葵花籽多肽生物活性方面的深入研究报道相对较少。本文以葵花籽粕为研究对象,采用响应面设计、抗氧化试验、生物酶解、凝胶色谱、高效液相色谱、质谱等方法,系统研究了葵花籽粕中绿原酸和蛋白质的提取工艺条件及理化性质、蛋白质酶解工艺的各主要参数、酶解物体外抗氧化活性和对血管紧张素I转换酶(ACE)的抑制作用、抗氧化肽和降血压肽分离和结构的初步鉴定,为开发利用葵花籽粕中绿原酸和蛋白质及其抗氧化肽、降血压肽功能性产品提供理论基础。主要结果如下:1.葵花籽粕中绿原酸提取的优化工艺条件:乙醇浓度为75%、料液比为1∶14、温度为40℃、pH为4.9、提取99min,萃取率达到了64.73%,其抗氧化能力在同等剂量的条件下,其还原力和对自由基的清除能力都高于Vc。葵花籽粕中球蛋白提取的最佳工艺条件为:料液1:12,提取液浓度1mol/L,温度50℃,时间1.5h。葵花籽粕球蛋白功能性质除吸水性低于大豆分离蛋白外,其吸油性、起泡性、起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性都高于大豆分离蛋白,并且是一个全价蛋白。2.以葵花籽粕球蛋白为底物,筛选出制备抗氧化活性肽的酶是碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶;制备降血压活性肽的酶是中性蛋白酶。在各自单因素试验的基础上,采用响应面设计进行了试验优化,结合各因素、各因素对响应值的影响顺序以及综合考虑到成本问题,确定了各自最佳酶解条件。其中:碱性蛋白酶:底物浓度为2%,pH为9.64,[E]/[S]3%,温度为51.31℃,时间为115.4min,该条件下制备的葵花籽粕球蛋白酶解物的DPPH清除率为50.85%。木瓜蛋白酶的最优酶解条件为:底物浓度为3%,pH为6.5,[E]/[S]5.54%,温度为61.02℃,时间为116.39min,该条件下制备的葵花籽粕球蛋白酶解物的DPPH清除率为73.11%。中性蛋白酶:底物浓度4%,[E]/[S]2.72%,温度52℃,pH7.0,水解时间为90min,该条件下制备的葵花籽粕球蛋白酶解物的ACE抑制率为61.55%,其半抑制浓度为0.45mg/mL。3.木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解物在5种体外抗氧化体系中均表现出较强的抗氧化活性。对·OH、O2-·、DPPH·清除作用以及还原能力均与浓度呈量效关系,IC50分别为5.7mg/mL、2.5mg/mL、1.5mg/mL左右,能明显抑制大豆卵磷脂的脂质过氧化和豆油的氧化作用,随着添加量的增加,其抗氧化效果越来越明显。4.凝胶色谱、液相色谱能很好的分离提纯活性较强的酶解物,质谱能进一步确定分子量及初步结构。中性蛋白酶酶解物峰2的分子量为1114.5:推测其氨基酸序列为DLWLRLDPS(Asp-Leu-Trp-Leu-Arg-Leu-Asp-Pro-Ser),中性蛋白酶峰3的分子量为1114.6,推测其氨基酸序列为DLPWPFRSP (Asp-Leu-Pro-Trp-Pro-Phe-Arg-Ser-Pro);木瓜蛋白酶酶解物峰2的分子量是1261.6,推测其氨基酸序列为FDIVKADNVGPS (Phe-Asp-Ile-Val-Lys-Ala-Asp-Asn-Val-Gly-Pro-Ser);碱性蛋白酶的分子量为1038.5,推测氨基酸序列为RHAKTPSNK (Arg-His-Ala-Lys-Thr-Pro-Ser-Asn-Lys)。
其他文献
<正> 一、音乐教育的首要目的是让学生 理解并享受音乐 达尔克罗兹、奥尔夫和柯达依都在音乐教学实践中感到了传统音乐教育中强调枯燥的技能训练和刻板的理论学习的种种弊端
<正> 我十九岁拜施春轩为师,继承施派。几十年来,演过多次《雷雨》,每次总是担任鲁贵这一角色,只要安排我饰演“鲁贵”这一人物,心里总是说不出的高兴,我对鲁贵有着“深厚的
熟背经典对提高人们的人文素养和语言素质,乃至对人的终身发展都是非常有益的。可是长篇内容的背诵对于人的记忆力是一个极大的挑战,不仅需要花费很长时间来背诵,而且还容易
介绍了与自制仪器改进有关的一氧化碳可燃性、还原性的实验,现象明显,有利于学生对一氧化碳性质的认识。
成长是朱天文小说创作一直关注的主题之一。其创作的《小毕的故事》、《风柜来的人》、《童年往事》等均涉及成长。小说蕴含丰富的意蕴,既有青春期的叛逆,也有建构自我的努力
<正>主题:动手实践、自主探究、合作交流的教学思考本文通过两个案列片段教学来谈谈自己在数学定理教学中培养学生动手操作能力的一些实践和思考.情景片段1:1、操作与观察(1)
考察了培养基组成、培养时间、接种量、pH值、肌醇浓度等对冠瘿组织生长及其人参皂苷含量的影响 ;用HPLC检测了冠瘿组织中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 的含量。高压纸层析电泳证
[目的]探讨同质医疗服务模式在综合医院外科病房的护理实践。[方法]通过自愿及竞聘的原则从胃肠外科、胸外科、骨外科3个专科中选出3个病房试验组,并各设置顾问护士1名,与医
<正>题目(2012年安徽高考理科卷第20题):如图,F1(-c,0),F2(c,0)分别是椭圆C:x2/a2+y2/b2=1(a>b>0)的左、右焦点,过点F1作x轴的垂线交椭圆的上半部分于点P,过点F2作直线PF2的
交通事故中有相当一部分是由于醉酒驾驶、飙车等危险驾驶行为引起的,尤其以醉酒驾驶最为多发。《刑法修正案(八)》增加了危险驾驶罪这一新的罪名,危险驾驶罪的设立实现了刑法