【摘 要】
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紫色紫孢菌（Purpureocillium lavendulum）是紫孢属（Purpureocillium）中报道的一种不同于淡紫紫孢菌（Pur.lilacinum）的新种。近年来微生物资源防治植物病原线虫的研究、开发备受重视,根据文献报道,紫孢属是目前最有潜力的生物防治植物寄生线虫的真菌之一,而紫色紫孢菌作为一种广谱性很强的生防菌,其生物防治机理已有较好的研究基础,但其次级代谢产物在防治病害方面
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紫色紫孢菌（Purpureocillium lavendulum）是紫孢属（Purpureocillium）中报道的一种不同于淡紫紫孢菌（Pur.lilacinum）的新种。近年来微生物资源防治植物病原线虫的研究、开发备受重视,根据文献报道,紫孢属是目前最有潜力的生物防治植物寄生线虫的真菌之一,而紫色紫孢菌作为一种广谱性很强的生防菌,其生物防治机理已有较好的研究基础,但其次级代谢产物在防治病害方面的报道较少。本论文以两株紫色紫孢菌（Pur.lavendulum YMF1.00683和YMF1.00073）作为研究对象,基于液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）和TLC检测分析,对紫色紫孢菌产丰富次级代谢产物的培养条件进行筛选,并扩大发酵积累次级代谢产物;采用传统的天然产物化学方法（两相溶剂萃取法、薄层层析法、硅胶柱吸附层析法、凝胶过滤层析法、高效液相色谱法（HPLC）等）对紫色紫孢菌产生的次级代谢产物进行分离纯化,通过核磁共振波谱、质谱和紫外光谱等数据,结合各种天然产物的数据库,对分离得到的化合物进行结构鉴定,并进一步进行了化合物的活性研究。对紫色紫孢菌（Pur.lavendulum）YMF1.00683和YMF1.00073进行培养基筛选,提取物通过TLC检测和LC-MS对比分析,均选择SDA固体培养基进行发酵。从紫色紫孢菌（Pur.lavendulum）YMF1.00683发酵产物中分离鉴定了12个化合物,其中化合物1为新的甾体类化合物,其余的11个均为已知化合物,包括甾体类、脂肪酸类、核苷酸类、吡咯类。从紫色紫孢菌（Pur.lavendulum）YMF1.00073发酵产物中分离鉴定了10个化合物,均为已知化合物,主要包括环二肽类、呋喃类、酰胺类和核苷酸类。对分离鉴定得到的代谢产物根据其结构特点,选择化合物进行对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）的毒杀活性测试,结果表明从紫色紫孢菌（Pur.lavendulum）YMF1.00683分离的化合物5-?methoxymethyl?-1H-?pyrrole-?2-?carboxaldehyde（化合物7）在400μg/m L浓度下,96 h时对南方根结线虫（M.incognita）表现出强毒杀活性（校正致死率达到98.2%）;在400μg/m L浓度下具有明显抑制南方根结线虫（M.incognita）卵孵化的活性;对南方根结线虫（M.incognita）的趋化实验显示:当化合物7浓度为40μg/m L时对根结线虫表现出强趋避作用（C.I.=-0.38）,而当化合物7的浓度减小到5μg/m L时,则表现出较弱的吸引作用（0＜C.I.＜0.2）。化合物7,8-dimethylalloxazine（化合物6）在浓度为400μg/m L时也能够明显抑制南方根结线虫（M.incognita）卵的孵化。化合物ergosterol peroxid（化合物4）和3β,5α,9α-trihydroxy-ergosta-7,22-dien-6-one（化合物3）在浓度为400μg/m L,96h时对南方根结线虫（M.incognita）表现出中等毒杀活性（校正致死率达到30%～70%）。从紫色紫孢菌（Pur.lavendulum）YMF1.00037分离的化合物5-hydroxymethyl-furfura（化合物13）和5-hydroxymethylfuran-2-carboxylic acid（化合物22）在浓度为400μg/m L,48 h时对南方根结线虫（M.incognita）表现出中等毒杀活性（校正致死率达到30%～70%）;化合物cyclo（L-Ala-L-Pro）（化合物16）在浓度为400μg/m L,12 h内对南方根结线虫（M.incognita）表现出较好的麻痹效果,而在18 h时,这种麻痹效果基本解除。同时化合物16在20μg时对南方根结线虫（M.incognita）表现出较强排斥作用（C.I.=-0.3657）。化合物methyl indole-3-carboxylate（化合物19）对南方根结线虫（M.incognita）表现出浓度依赖的吸引活性,在100μg时表现出较强吸引活性（C.I.=0.29）。以上结果表明,紫色紫孢菌可以产生对南方根结线虫（M.incognita）具有多种活性的小分子代谢产物。
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