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目的：外周血中游离的DNA主要是指存在于血浆，血清等循环系统里的一些小片段DNA。它是机体代谢的正常生理表现，但是在一些病变或类病变机体中这类游离的DNA的含量和组成会发生变化。这些研究结果在一些疾病的临床诊断以及非创伤性早期妊娠诊断方面给人们提供了一个新的检测诊断方法。本研究应用三种方法从绵羊外周血浆/血清中分离提取游离DNA，建立高效的外周血游离DNA提取方法，并对SRY基因进行PCR扩增开展早期胎儿性别鉴定，同时对利用游离DNA进行基因突变筛选的可行性做初步的研究。方法：1、绵羊外周血中游离DNA提取及SRY基因检测。利用加热法、酚氯仿法以及试剂盒从500μL血浆/血清中提取游离的DNA。根据游离DNA片段的特点分别设计扩增产物为168bp的MC1R检测引物和178bp的SRY基因引物进行普通PCR检测。2、不同妊娠时期胎儿性别鉴定。利用试剂盒提取血浆样品中游离DNA，设计巢式PCR引物，优化扩增体系。对SRY基因特异性扩增，并统计各个妊娠阶段的检测结果与分娩结果分析。3、利用酶切及HRM技术对血浆DNA中绵羊FecB基因进行分型效果研究。结果：1、利用加热法、酚氯仿法、试剂盒法都提取到了游离的DNA，PCR后通过琼脂糖凝胶电泳检测到了168bp的目的片段。同时利用PCR扩增到了178bp的SRY基因目的片段。2、通过对结果分析显示，阳性检出率随着妊娠时期的推移而增加。3wk-6wk以内总共17个样本其中SRY检测结果阳性为11个，分娩结果公羊为10只，SRY检出率为88.2%（10/11）。6wk以上23个样本，SRY检测阳性样本为17个，分娩结果公羊为17只SRY基因检出率达到88.2%（15/17）。3、利用高分辨率熔解曲线（HRM）技术对绵羊FecB基因多态位点分型结果与测序后结果相比较准确率达到95.83%。结论：1、不同的提取方法均可有效提取分离绵羊外周血血清和血浆中游离的DNA片段，能够用于SRY基因的检测。2、本研究成功从妊娠的绵羊外周血中提取到游离的胎儿DNA,并利用巢式PCR扩增到了雄性胎儿的SRY基因。这就说明利用这类游离DNA进行妊娠早期胎儿性别鉴定是可行的，同时可以对一些遗传相关的疾病进行非创伤性早期诊断3、血浆DNA可以用于基因突变筛选的研究。