【摘 要】
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丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是一种威胁人类健康的重要病毒。目前,尚缺乏特异、有效的治疗措施,故探索新型抗HCV的治疗方法具有重要意义。本课题选择HCV基因组中序
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丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是一种威胁人类健康的重要病毒。目前,尚缺乏特异、有效的治疗措施,故探索新型抗HCV的治疗方法具有重要意义。本课题选择HCV基因组中序列相对保守、且在病毒复制过程中起关键作用的核心基因(core gene,C)作为靶基因,针对该基因mRNA中四个潜在切割位点(第52、167、347、438位),在大肠杆菌RNase P催化亚基(M1 RNA)的基础上,构建了相应的四个特异性M1GS核酶。通过胞外切割试验对所构建的M1GS核酶的靶向切割活性进行研究,结果发现针对第167位点的M1GS核酶能对HCV核心基因的mRNA进行靶向切割,产生167nt和420nt大小的切割产物片段;而针对其他三个位点的M1GS核酶的靶向切割活性则并不明显。进一步将针对第167位的M1GS核酶基因克隆至真核表达载体(pcDNA3.1)中,构建M1GS核酶真核表达性重组质粒(pcDNA-M1GS2);并与另外所构建的HCV核心基因真核表达性重组质粒(pcDNA-HCV/core)共转染HeLa细胞,以探讨胞外初筛有效的M1GS核酶能否在胞内抑制靶基因的表达。通过半定量的RT-PCR和westen blot,结果表明该M1GS核酶在胞内不仅可使靶基因mRNA的水平明显降低,而且可大大降低HCV核心蛋白的表达量。总之,通过本课题的研究,我们成功获得一种可在胞内、外对HCV核心基因mRNA进行靶向切割的M1GS核酶,从而为今后更进一步的研究(如胞内抗HCV感染、体内抗HCV感染等)提供直接的实验材料,也为M1GS这种新型核酶技术用于抗HCV治疗的研究奠定了坚实基础。
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摘 要： 中国语言博大精深，它既富含哲理，又具有文学之美，因此高中语文教师在教学时应该强化学生的美学意识，调动他们参与语文学习的积极性和主动性，最终实现高中语文课堂教学目标。本文对美学理念在高中语文教学中的渗透方法进行了分析，旨在激发学生学习语文的热情，感受语文丰富的内涵，用“美”的眼光享受和感悟语文。 关键词： 美学理念 高中语文 教学方法 渗透方式 1.引言 高中语文教师在教学过程中应该
摘 要： 古诗教学对提高学生感知能力、分析能力、想象能力、鉴赏能力等具有重要意义。因而教学实践中语文教师应探索诗歌教学方法，提高学生阅读古典诗歌的能力，为发扬民族优秀文化传统而努力。可采取的措施：描绘的画面，引导学生入境。剖析诗眼，引导学生入境。找诗情与学生情感体验的契合点，使作品之境与学生之情交融。让学生通过阅读不同风格的诗感受不同美的样式，鼓励学生在学习生活中用诗、写诗。 关键词： 意境教学
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摘 要： 文言文作为我国文化魁宝，具有重要的史学价值、文学价值和教育意义，对学生发展有着举足轻重的作用。在我国语文教育教学中，文言文已经成为非常重要的组成部分，无论是各类考试还是考察中都占有一定比例。新课标下，高中语文文言文考查形式和考查内容都发生了一定的变化，一线语文教师必须革新教学思维，创新教学模式，采取有效对策提高文言文教学质量。作者结合多年教学经验，重笔分析文言文教学方法，希望对文言文教学
摘 要： 无论是教师还是家长，都希望学生和孩子在学习方面不让自己费心，学生其实也不希望在学习方面别人给予过多束缚。因此提高学生自主学习能力，对每一位教师而言都是至关重要的。 关键词： 初中语文 大纲解读 自主学习能力培养 我们在平时学习生活中经常听到这样一个名词，即自主学习能力。对于语文这样一门科目而言需要学生具有好的学习品质。教师在平时教学过程中要注意培养学生自主学习能力。 一、明确学生心