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目的研究小春花不同萃取部位在哮喘动物模型中的镇咳平喘作用,筛选出小春花的有效活性部位,进而观察其对白三烯受体mRNA表达的影响,并探讨小春花各部位平喘的作用机制,为小春花的临床应用及中药新药研发提供实验基础。方法将小春花用70%乙醇回流提取,得到小春花总浸膏。将总浸膏用一定体积水分散并依次用等体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,分别得到石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层和正丁醇层。利用氨水雾化引咳法、组胺喷雾致喘法和卵蛋白致敏法筛选小春花镇咳平喘的作用部位。通过RT-PCR法和琼脂糖凝胶电泳分析小鼠CysLT1,2受体mRNA的表达,用2-△△Ct法定量分析小鼠CysLT1受体mRNA的表达量,探讨小春花各萃取部位对支气管哮喘小鼠白三烯受体mRNA表达的影响。结果1、镇咳实验中,小春花各部位对氨水引咳的小鼠的咳嗽潜伏期没有明显影响,而小春花氯仿层和乙酸乙酯层对小鼠在3 min内的咳嗽次数明显减少(P<0.01)。2、组胺喷雾致喘实验中,与对照组相比,小春花各萃取部位均能延长豚鼠急性哮喘的潜伏期,其中石油醚层和氯仿层能明显延长引喘潜伏期(P<0.01),乙酸乙酯层也可延长引喘潜伏期并具有统计学差异(P<0.05)。3、卵蛋白致敏哮喘实验中,与模型组相比,小春花各萃取部位均能降低哮喘小鼠气道缩窄指数(Penh),其中石油醚层、氯仿层和正丁醇层相比其他各部位的效果更明显(P<0.01);小春花氯仿层和乙酸乙酯层能明显升高小鼠潮气量(TV)(P<0.01);小春花氯仿层和乙酸乙酯层组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞的比例比模型组明显降低(P<0.01);与模型组相比较,小春花石油醚层和乙酸乙酯层能明显减少IL-4的水平,降低IL-4/IFN-γ的比值(P<0.05);小春花各萃取部位能减轻炎性细胞对气道组织的浸润,减轻哮喘小鼠的气道炎症反应;小春花各萃取部位能减轻气道上皮细胞的增厚,延缓气道重塑的发生。4、白三烯受体mRNA表达的实验中,CysLT1受体mRNA的扩增较好,产物相对稳定,能用2-△△Ct法进行相对定量,而CysLT2受体mRNA的表达较低,产物存在大量的引物二聚体,不能进行定量分析。与模型组相比较,小春花各萃取部位的CysLT1受体mRNA的表达均有明显减少,其中小春花氯仿层和乙酸乙酯层有极显著性差异(P<0.01),石油醚层有显著性差异(P<0.05);CysLT2受体mRNA的表达不能进行相对定量。结论通过氨水引咳实验、组胺喷雾致喘实验和卵蛋白致敏实验考察了小春花各部位镇咳平喘的作用,综合分析表明氯仿层和乙酸乙酯层为小春花镇咳平喘的作用部位,其平喘作用机制与抑制支气管哮喘小鼠CysLT1受体mRNA的表达有关。