大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)是我国特有的濒危物种,同时也是珍贵的世界自然遗产。在经历了漫长的800万年的历史变迁后,现如今的大熊猫仅零星分布于我国的秦岭、岷山、邛崃山、大相岭、小相岭、凉山六大山系;同时由于人类发展,大熊猫还面临着栖息地丧失和破碎化的威胁,四川省野生大熊猫种群被分割为22个局域种群,其中局部孤立小种群濒临灭绝的风险。为及时准确掌握大熊猫种群动态及现状,科学评估种群续存潜力,有效促进大熊猫保护与管理,我们对小相岭山系栗子坪国家级自然保护区的孤立野生大熊猫小种群进行了研究。为了解栗子坪保护区野生大熊猫的种群数量及生存现状,2016年5月-2017年7月期间,我们首先通过调查大熊猫痕迹点和采集新鲜粪便,分析了该区域大熊猫的分布特征;并通过距离—咬节区分法和微卫星DNA标记法对研究区域内大熊猫种群数量进行了调查。其次,在粪便采集的过程中,收集样线上所遇到的大熊猫同域动物痕迹及人为干扰类型等相关信息,以探讨在大熊猫栖息地内其他野生动物与大熊猫之间的资源利用与竞争关系(天敌、竞食等情况)及人为干扰对大熊猫生存的影响。最后运用微卫星结果分析栗子坪自然保护区野生大熊猫小种群的遗传多样性、遗传结构等。种群数量分析结果显示,研究区域内大熊猫集中分布于公益海和麻麻地附近,其他区域大熊猫零星分布。痕迹点分布在功能区划上呈现核心区>缓冲区>实验区。通过距离-咬节法识别出18只野生大熊猫,主要分布于麻麻地和阿鲁伦底河区域。运用微卫星分子标记方法鉴定出23只大熊猫个体(包括2只圈养大熊猫放归个体“淘淘”和“张想”)。微卫星遗传多样性分析表明,12个微卫星标记位点共获得68个等位基因,平均观测等位基因(MNA)的值为5.667,有效等位基因(Ne)范围在2.037~7.896之间,平均有效等位基因数为4.114。栗子坪保护区大熊猫小种群的平均观测杂合度(Ho)为0.430;平均期望杂合度(He)为0.733,12个微卫星标记的位点多态信息含量(PIC)平均值为0.674,基因座位呈现出高度多态性。SRUCTURE分析表明栗子坪国家级自然保护区野生大熊猫遗传基因簇分为三簇。本次调查到大熊猫栖息地同域动物隶属2纲5目12科,其中有国家Ⅰ级保护动物1种为林麝(Moschus berezovskii),国家Ⅱ级保护动物10种:藏酋猴(Macaca thibetana)、猕猴(Macaca mulatta)、黑熊(Ursus thibetanus)、小熊猫(Ailurus fulgens)、黄喉貂(Martes flavigula)、中华斑羚(Naemorhedus goral)、中华鬣羚(Capricornis sumatraensis)、白腹锦鸡(Chrysolophus amherstiae)、红腹角雉(Tragopan temminckii)、血雉(Ithaginis cruentus)。通过人为干扰因素对大熊猫栖息地的影响研究,人为干扰主要分布于2197-3758m海拔之间,共12种干扰类型。其中干扰类型遇见次数最多的是放牧,其次是附近居民进入保护区挖药。本文对栗子坪保护区大熊猫种群生存现状的研究结果可以评估为栗子坪保护区大熊猫放归成效及保护工作的成效,对该保护区大熊猫种群数量、遗传多样性和遗传结构的分析结果可为后来其他大熊猫小种群壮大提供科学的参考,同时也有助于科学评估种群续存潜力。大熊猫同域动物和人为干扰的调查研究有助于为栗子坪国家级自然保护区大熊猫栖息地的进一步保护工作奠定基础。