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目的:观察芪龙调血方对环磷酰胺骨髓抑制模型小鼠一般情况、骨髓有核细胞计数、外周血象、骨髓细胞Bcl-2/Bax蛋白及血清中细胞因子IL-7表达水平的影响,初步探讨芪龙调血方对环磷酰胺骨髓抑制小鼠的可能作用机制。
方法:健康清洁级昆明小鼠75只,雄性,实验开始前适应性饲养7天,观察无异常后开始造模,除正常对照组外,其余小鼠均腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg/d)建立骨髓抑制小鼠模型,连续3天,后将造模组小鼠随机分为模型对照组(以下简称模型组)、芪龙调血方高剂量组(以下简称高剂量组)、芪龙调血方中剂量组(以下简称中剂量组)、芪龙调血方低剂量组(以下简称低剂量组),每组15只。
造模完成并分组后每组随机抽取5只小鼠拨眼球取血法采血,检测外周血象,脱颈椎处死小鼠,取左侧股骨冲出骨髓,计数骨髓有核细胞;正常对照组和模型对照组分别以生理盐水0.2mL/109/d灌胃,连用1Od:中药低、中、高剂量组分别以浓度为O.759/ml、1.59/ml、39/ml的中药液0.2mL/109/d灌胃,连用1Od。分别在给药第3d、9d每组随机抽取5只小鼠断尾取血检测外周血象:最后一次给药24h后拨眼球取血法采血,检测外周血象,并用ELISA法检测小鼠血清IL-7表达水平:将小鼠脱颈椎处死,剥离股骨冲出骨髓,用免疫组化法检测Bcl-2/Bax表达水平。实验期间密切观察各组小鼠的一般情况,并做详细记录。
结果:1.小鼠的一般情况:模型对照组小鼠出现喜欢聚集、精神萎靡、行动迟缓、对外界刺激反应迟钝、被毛凌乱光泽减弱、进食饮水减少、大便稀溏等现象。中药各剂量组小鼠精神状态一般,行动稍迟缓,无明显精神萎靡、进食减少、大便稀溏等现象。
2.血清IL-7:与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清IL-7表达水平较低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,各给药组血清IL-7水平均不同程度上调,除中药高剂量组差异无统计学意义外(P>0.05),其余各组均有统计学意义(P<0.05):中药各剂量组进行两两比较,中、低剂量组血清IL-7水平较高剂量组高,差异有统计学意义(P<0.05)。
3.骨髓细胞Bcl-2:与正常对照组比较,模型组及各中药组Bcl-2水平均不同程度下降,差异具有统计学意义(P<0.05):与模型组比较,中药各剂量组Bcl-2表达均有所上升,除中药高剂量组外,其余各组差异均具有统计学意义(P<0.05):中药各剂量组进行两两比较,与中药高剂量组比较,中药低剂量组Bcl-2水平升高明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。
4.骨髓细胞Bax:与模型对照组比较,各组Bax表达水平均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);中药各剂量组进行两两比较,与中药高剂量组比较,中药中剂量组小鼠Bax表达下降不明显,差异无统计学意义,中药低剂量组小鼠Bax表达水平下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.芪龙调血方可以在一定程度上改善环磷酰胺骨髓抑制小鼠的一般情况;2.芪龙调血方可不同程度增加环磷酰胺骨髓抑制小鼠外周血细胞的数目;3.芪龙调血方可以上调环磷酰胺骨髓抑制小鼠血清IL-7水平;4.芪龙调血方能上调环磷酰胺骨髓抑制小鼠骨髓Bcl-2表达水平、下调Bax表达水平。
方法:健康清洁级昆明小鼠75只,雄性,实验开始前适应性饲养7天,观察无异常后开始造模,除正常对照组外,其余小鼠均腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg/d)建立骨髓抑制小鼠模型,连续3天,后将造模组小鼠随机分为模型对照组(以下简称模型组)、芪龙调血方高剂量组(以下简称高剂量组)、芪龙调血方中剂量组(以下简称中剂量组)、芪龙调血方低剂量组(以下简称低剂量组),每组15只。
造模完成并分组后每组随机抽取5只小鼠拨眼球取血法采血,检测外周血象,脱颈椎处死小鼠,取左侧股骨冲出骨髓,计数骨髓有核细胞;正常对照组和模型对照组分别以生理盐水0.2mL/109/d灌胃,连用1Od:中药低、中、高剂量组分别以浓度为O.759/ml、1.59/ml、39/ml的中药液0.2mL/109/d灌胃,连用1Od。分别在给药第3d、9d每组随机抽取5只小鼠断尾取血检测外周血象:最后一次给药24h后拨眼球取血法采血,检测外周血象,并用ELISA法检测小鼠血清IL-7表达水平:将小鼠脱颈椎处死,剥离股骨冲出骨髓,用免疫组化法检测Bcl-2/Bax表达水平。实验期间密切观察各组小鼠的一般情况,并做详细记录。
结果:1.小鼠的一般情况:模型对照组小鼠出现喜欢聚集、精神萎靡、行动迟缓、对外界刺激反应迟钝、被毛凌乱光泽减弱、进食饮水减少、大便稀溏等现象。中药各剂量组小鼠精神状态一般,行动稍迟缓,无明显精神萎靡、进食减少、大便稀溏等现象。
2.血清IL-7:与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清IL-7表达水平较低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,各给药组血清IL-7水平均不同程度上调,除中药高剂量组差异无统计学意义外(P>0.05),其余各组均有统计学意义(P<0.05):中药各剂量组进行两两比较,中、低剂量组血清IL-7水平较高剂量组高,差异有统计学意义(P<0.05)。
3.骨髓细胞Bcl-2:与正常对照组比较,模型组及各中药组Bcl-2水平均不同程度下降,差异具有统计学意义(P<0.05):与模型组比较,中药各剂量组Bcl-2表达均有所上升,除中药高剂量组外,其余各组差异均具有统计学意义(P<0.05):中药各剂量组进行两两比较,与中药高剂量组比较,中药低剂量组Bcl-2水平升高明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。
4.骨髓细胞Bax:与模型对照组比较,各组Bax表达水平均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);中药各剂量组进行两两比较,与中药高剂量组比较,中药中剂量组小鼠Bax表达下降不明显,差异无统计学意义,中药低剂量组小鼠Bax表达水平下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.芪龙调血方可以在一定程度上改善环磷酰胺骨髓抑制小鼠的一般情况;2.芪龙调血方可不同程度增加环磷酰胺骨髓抑制小鼠外周血细胞的数目;3.芪龙调血方可以上调环磷酰胺骨髓抑制小鼠血清IL-7水平;4.芪龙调血方能上调环磷酰胺骨髓抑制小鼠骨髓Bcl-2表达水平、下调Bax表达水平。