葡萄籽中原花色素的提取、纯化及分析方法研究

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原花色素是一种多酚类化合物,由于其具有非常强的抗氧化和清除自由基能力因而在医药、保健、食品等领域中具有广泛用途。它广泛存在于葡萄、松树、苹果等植物中,其中葡萄籽是其最重要的来源。 本文对原花色素的分析方法进行了改进,首先采用反相液相色谱—电喷雾质谱分析产品的组成,根据质谱的准分子离子[M-H](m/z)检测其单体和低聚体,提高了产品的分析标准;其次是改进了邻苯三酚自氧化法测定原花色素抗氧化性能的方法:测定波长420nm;缓冲体系为Tris-HAc;邻苯三酚浓度为10mmol/L;pH值为8.2;Tris-HAc浓度为0.05mol/L,提高了测活灵敏度。 实验考察了提取、纯化和精制工艺过程中的诸多影响因素,确定了最佳工艺条件:以60%的丙酮水溶液为浸提剂,料液比为1:10,40℃下提取24小时。向浸提剂加入NaCl使其分相,首次将双水相技术应用于原花色素的纯化过程中。丙酮相浸提液经树脂吸附后用不同浓度乙醇溶液洗脱,洗脱液再经乙酸乙酯萃取后得到最终的产品,原花色素的提取率为0.59%,产品纯度为98%。
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