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前纤维蛋白是一种低分子量肌动蛋白结合蛋白，它的高级结构主要包括三个保守的结合域，分别为肌动蛋白结合结构域，多聚L-脯氨酸结合结构域和磷脂酰肌醇结合结构域，这三个结构域成为前纤维蛋白行使功能的基础。目前发现前纤维蛋白在一些细胞过程中如膜转运、小的GTPase信号途径、核内活性及神经发生及分化和肿瘤形成中起重要作用。广泛存在的前纤维蛋白与很多不同的配体相互作用，包括多聚磷脂酰肌醇、肌动蛋白、肌动蛋白相关蛋白及聚脯氨酸蛋白，前纤维蛋白可能通过特异的方式连接到不同的信号通路。
我们从本实验室构建的家蚕cDNA文库中获得家蚕前纤维蛋白cDNA，命名为BmPFN，其开放阅读框长度381 bp，编码由126个氨基酸残基组成的肽链。经DNAstar软件计算分子量为13.7 kDa，等电点为6.11。多序列比对结果显示其与赤拟谷盗(Tribolium castaneum，鞘翅目)的前纤维蛋白同源性最高，126个氨基酸残基中有105个一致，同源性为83﹪。设计PCR引入EcoRI和NotI酶切位点，双酶切连入表达质粒pGEX-5x-1，成功构建重组质粒pGEX-5x-1-BmPFN。将重组质粒转入BL21(DE3)并诱导表达，经SDS-PAGE鉴定在约40 kDa处有明显的表达条带，与预测的GST-profilin融合蛋白大小相符。融合蛋白先后经SephadexG50分子筛层析及GST亲和柱纯化至SDS-PAGE检测为一条带。用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体，间接ELISA法测得抗体效价为1：32000，用重组菌表达总蛋白做Westernblotting检测呈一条带。利用多克隆抗体对家蚕细胞Bm5进行亚细胞定位研究表明BmPFN主要分布于细胞质中。同时也进行了荧光定量PCR分析不同组织及发育时期该基因的表达差异，定量内参选用18srRNA，结果显示在各组织中丝腺表达量最高，生殖器表达量次之，脂肪体中的表达量最低；在卵、幼虫、蛹和蛾四个发育时期中，幼虫的表达量最高，蛹次之，蛾中较少，卵中表达量最少。RNA干扰实验显示BmPFN在家蚕细胞正常的增殖中起重要作用。本论文第一次对家蚕的前纤维蛋白进行了克隆表达及功能的研究，为今后家蚕前纤维蛋白的研究创造了条件。