RecQ-BLM解旋酶在细胞的增殖生长等过程中有着重要的调控作用,BLM解旋酶的缺失可引起人的Bloom综合征即面部红斑侏儒综合征遗传性疾病,并易患各种癌症。Lnc RNA在调控细胞的生长增殖等过程中也发挥着重要的调控作用,Lnc RNA能通过竞争性内源RNA（competitive endogenous RNA,ce RNA）作用机制发挥作用,当它作为内源性竞争RNA时,它能够竞争性结合微小RNA（micro RNA,mi RNA）,进而解除或者部分解除mi RNA对靶基因的抑制作用,促进靶基因的表达,从而提高细胞的增殖等能力。YAP和TAZ蛋白作为哺乳动物Hippo信号通路下游的转录共激活因子和关键成分,主要参与细胞调控当中的细胞增殖、凋亡以及迁移等多种生理过程,可以作为增殖检测的指标基因。Lnc RNA是如何通过BLM基因对癌症进行调控的研究还鲜有报道。本课题组前期研究已证实mi R-27b-3p能够直接调控BLM解旋酶的3’UTR区抑制BLM的表达,因此本文以mi R-27b-3p为材料筛选对BLM具有调控作用的Lnc RNA。利用分子克隆技术构建Lnc RNA真核超表达载体。通过CCK8增殖试验、划痕试验、实时荧光定量PCR试验、Western blotting试验对BLM相关Lnc RNA LINC183（N183）和Lnc RNA LINC212（N212）进行验证。我们分析了N183和N212在22RV1、PC3、WPMY-1细胞中的表达水平和超表达后对22RV1、PC3细胞内BLM、YAP、TAZ基因的m RNA、蛋白表达水平的影响以及对细胞增殖和迁移的影响。其主要研究结果如下:1.BLM相关Lnc RNAs的筛选和表达谱分析成功筛选NONHSAT184603.1（简称为Lnc RNA LINC183,N183）和NONHSAT216122.1（简称为Lnc RNA LINC212,N212）两条Lnc RNA,N183全长766 bp,位于2号染色体,N212全长1195 bp,位于8号染色体。与正常上皮细胞WPMY-1相比,BLM基因在22RV1和PC3细胞中的表达为极显著下调（p<0.01）,N183和N212基因在22RV1和PC3细胞中的表达都极显著上调（p<0.01）。2.超表达N183和N212对BLM基因表达水平影响构建pCDNA3.1-N183和pCDNA3.1-N212真核超表达载体并转染WPMY-1、22RV1和PC3细胞三种细胞,采用实时荧光定量PCR技术和Western Blotting技术来对BLM基因、YAP基因和TAZ基因在m RNA和蛋白水平的表达情况进行检测。结果显示N183和N212能够在m RNA和蛋白水平上提高BLM解旋酶的表达,并可能对细胞增殖产生影响,转染N212后22RV1细胞内的BLM蛋白下调可能是因为N212主要在转录水平起作用。3.N183和N212对前列腺癌细胞增殖和迁移产生促进作用采用CCK8测增殖的方法来对超表达后不同时间点的细胞活性进行检测。结果显示超表达N183后,22RV1细胞的增殖与空白对照组相比为极显著上调（p<0.01）;超表达N212后,PC3细胞的增殖与空白对照组相比为极显著上调（p<0.01）,说明N183和N212对前列腺癌细胞的增殖能够产生促进作用。采用细胞划痕实验来对细胞的迁移进行检测。结果显示22RV1细胞转染N183和N212真核超表达载体后,其愈合面积与空白对照组相比极显著缩小（p<0.01）;PC3细胞转染N183和N212真核超表达载体后,其愈合面积与空白对照组相比极显著缩小（p<0.01）,说明N183和N212对前列腺癌细胞的迁移能够产生促进作用。综上,试验证实了N183和N212在前列腺癌细胞内高表达且N183和N212通过mi RNA作用路径,mi R-27b-3p正反馈作用于BLM,提高BLM的表达,促进了前列腺癌细胞的增殖和迁移。