论文部分内容阅读
目的:通过对对叶百部总生物碱的HPLC图谱和止咳作用的药效数据相关性分析研究,以及对含药血清的药物化学研究,建立全国29个产地对叶百部总生物碱与止咳作用的谱-效关系,阐明对叶百部总生物碱的止咳作用物质基础。方法:1.采用HPLC法对全国29个产地的对叶百部的总生物碱进行HPLC图谱分析,找出共有峰及共有峰面积;2.以2 min内小鼠的咳嗽次数、抑咳率和咳嗽潜伏期为药效评价指标对对叶百部总生物碱的止咳作用进行药效学实验;3.采用灰色关联度分析方法,对全国29个产地的叶百部总生物碱的HPLC图谱的8个共有峰峰面积与止咳的2个评价指标（2 min内咳嗽次数、抑咳率）进行相关性分析,对对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系进行研究;4.采用偏最小二乘回归分析方法,对全国29个产地的对叶百部总生物碱的HPLC图谱的8个共有峰峰面积与止咳的2个评价指标（2 min内咳嗽次数、抑咳率）进行相关性分析,对对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系进行研究;5.采用UPLC-Q-TOF-MS和Metabolynx分析方法对对叶百部总生物碱的血清药物化学进行研究。结果:1.全国29个产地的对叶百部总生物碱的HPLC图谱有8个共有峰;2.对叶百部总生物碱对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,与百部的止咳功效一致;3.灰色关联度分析法法得到对叶百部总生物碱的共有峰与咳嗽次数的关联度X0的大小顺序为氧代对叶百部碱>2号峰异对叶百部新碱>1号峰金刚大碱>7号峰>4号峰对叶百部碱>8号峰>对叶百部碱H>新对叶百部碱,各共有峰与抑咳率的关联度X0的大小顺序为对叶百部碱>金刚大碱>对叶百部碱H>新对叶百部碱>异对叶百部新碱>氧代对叶百部碱>7号峰>8号峰;3.偏最小二乘回归法得到2 min内小鼠的咳嗽次数与对叶百部总生物碱的HPLC图谱之间的回归方程为YA=-0.07X1-X2+0.75X3-0.12X4-0.11X5+0.38X6-0.31X7-0.07X8（YA为对叶百部总生物碱给小鼠灌胃给药后2 min内小鼠的咳嗽次数;Xn为对叶百部总生物碱各共有峰的贡献值）;抑咳率与对叶百部总生物碱的HPLC图谱之间的回归方程为YB=0.01X1+0.05X2-0.77X3-0.09X4+0.09X5-0.28X6+0.25X7+0.03X8（YB为对叶百部总生物碱给小鼠灌胃给药后的抑咳率;X为对叶百部总生物碱各共有峰的贡献值）。4.在对叶百部总生物碱的含药血清中找到15个入血成分,经分析推测为新对叶百部碱开环衍生物和Ineotuberostemonol的代谢产物.结论:1.全国29个产地的对叶百部总生物碱HPLC图谱与止咳作用具有相关性。通过谱效关系研究发现,1号峰金刚大碱和7号峰未知化合物为对叶百部生物碱止咳作用的可能重要物质基础;2.新对叶百部碱开环衍生物和Ineotuberostemonol可能为止咳作用的主要药效物质基础。