解袋后不同色相富士苹果品质与全基因组甲基化的相关研究

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近些年来对于如何培育出优良富士苹果的系列探究一直是热门研究领域,培育出具有优质果品的富士苹果、并形成规模化体系后投入市场一直是大批研究者追寻的目标,所以探寻苹果品质优劣受到哪些内外因子的影响就显得尤为重要。本实验以十年生‘富士’作为母本材料,欲了解富士苹果解袋至上色完全期间,影响两种色相富士苹果(片红/条红)果实品质相关的生理生化指标、全基因组DNA甲基化模式分布以及相关基因表达的变化。1、结合聚类结果并通过对条红、片红富士生理与生化指标结果综合分析,可将解袋至完全上色期间的富士苹果品质变化分为两个阶段:S1品质变化剧烈期(前8天)和S2品质变化平缓期(后3天);同时,优化了苹果的综合评价体系;富士苹果解袋至果皮完全上色的11天内,外在、内在品质均发生了变化,表面光洁指数呈下降趋势,果皮色泽变化显著、糖、酸、维生素C含量、挥发性香气物质发生变化且高峰出现在第8~9天。2、MSAP分析结果表明,不同色相富士苹果共扩增942个甲基化位点,全基因组DNA甲基化水平平均31.16%;Ⅲ型、Ⅳ型甲基化水平在解袋第8~9天明显出现拐点;针对解袋后条红、片红富士果实品质变化的2个关键时期甲基化模式变化分析,比较结果显示二者均以去甲基化为主,且条红、片红富士变化趋势一致。3、根据相关性分析可得,随着解袋后天数变化条红富士与Ⅱ型甲基化水平、香气中总醇类含量呈显著正相关,片红富士与Ⅱ型甲基化、总醇类成分呈显著负相关性、而Ⅴ型甲基化水平变化与香气总酯类成分和总醇类成分呈显著负相关性,且条红富士与片红富士均与Ⅱ型甲基化存在差异显著性;针对于显著性差异分析结果可得,不论是条红、片红富士,解袋后天数均与Ⅳ型甲基化呈极显著性差异,与Ⅴ型甲基化呈显著性差异;同时主成分分析结果表明两种色相富士均在第11天与各个指标表现出强烈的相关性。以上结果都说明了富士苹果的解袋天数与DNA甲基化、挥发性香气间存在关联。4、利用荧光定量PCR技术,研究解袋天数与条红、片红富士内甲基转移酶基因和香气物质相关结构基因相关性。结论可得S1S2期,甲基转移酶基因中条红、片红富士的相关表达量均呈下降态势,而在香气物质相关结构基因中条红、片红富士的相关表达量均呈上升趋势;进行无重复双因素方差分析可知,条红、片红富士均与解袋天数与甲基化转移酶基因相关表达含量呈差异显著性,条红富士解袋天数与参与香气调控的结构基因的相对表达量呈差异显著性,而片红富士则呈差异极显著性。5、综合以上指标比较条红、片红富士结果显示,条红富士在橫纵径、重量、表面光洁指数、糖与维生素C含量、硬度均高于片红富士,条红富士去甲基化程度高于片红富士;而片红富士在酸含量、挥发性香气品质方面优于条红富士。随着解袋天数增加对比两种富士,条红富士内甲基转移酶基因下降程度高于片红富士,片红富士内香气物质相关结构基因上升程度高于条红富士。清算11天内富士的各类指标表明条红富士各类性状均优于片红富士。本文结果证实了DNA甲基化在富士苹果解袋至完全上色间,对果实品质各项指标变化发挥了作用,其中去甲基化参与了富士苹果解袋后的果实品质、风味改变进程;影响果实品质的挥发性香气指标与甲基化也存在关联;甲基化酶基因相对表达量呈现趋势与甲基化模式变化趋势一致,香气相关结构基因表达量与测量出挥发性香气变化结果相一致;条纹富士果实品质整体水平优于片红富士。
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