水凝胶因具有类似软组织的性质和能够实现细胞的均匀包载而被广泛的认为是三维细胞培养的理想支架。然而,水凝胶纳米级孔径限制了细胞的黏附和增殖以及新组织的形成,甚至限制了营养物质和细胞代谢废物在凝胶内外的扩散。为了克服这些缺点,有学者利用各种方法在凝胶结构中创造了大孔,其中,通过孔原浸出法引入大孔,可以方便地控制凝胶体中的孔隙度,有利于研究大孔结构对细胞行为和新组织形成的诱导作用。尽管近年来,大孔的水凝胶支架在三维细胞培养和组织工程方面取得了很大的进展,但其未来的发展仍面临着一些挑战,表现为在凝胶体中形成较大的孔也会导致凝胶结构的渗透性大幅度增加,进而导致营养物质的迅速扩散以及加速了水凝胶的降解速率。为此对人们期望通过设计或引入生物活性因子来促进细胞的增殖及黏附。在本工作中,我们制备了一种基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk(PLG-g-TA/RGD)的新型酶催化交联水凝胶,用于兔透明软骨细胞黏附和三维细胞培养的研究。成胶实验证明,PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根过氧化物酶(HRP)和H2O2存在下,能够通过酪氨基团的自交联快速形成水凝胶。而相同条件下,环状多肽(cRGDfk)的引入能够显著提高材料的溶液-凝胶转变速率和凝胶的强度。此外,细胞实验证明,透明软骨细胞在水凝胶表面黏附3天后,相比于PLG-g-TA水凝胶,PLG-g-TA/RGD水凝胶表面观察到更多的细胞黏附;将透明软骨细胞包载于水凝胶内部分别培养1/4/7天后,细胞在PLG-g-TA/RGD水凝胶内增殖效率明显高于PLG-g-TA水凝胶对照组。在以上的实验中,该水凝胶材料展现出良好的生物相容性。综上所述,cRGDfk的引入,促进了透明软骨细胞的黏附效率,提升了PLG-g-TA水凝胶材料在三维细胞培养方面的应用潜力。