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共轭亚油酸（Conjugated Linoleic Acid,CLA）是一种有多种有益功能的天然不饱和脂肪酸，现已被广泛用于药品、食品、饲料工业和保健品等领域。 亚油酸异构酶（Linoleic Acid Isomerase,LAI）可将亚油酸生物转化为共轭亚油酸，通过LAI催化获得单一和高活性的CLA异构体受到了人们的广泛关注。而LAI在细胞中的生物学功能、结构域、催化反应机理等尚未得到完整的解释，因此对LAI的结构与功能关系的研究便显得尤为重要。只有在了解LAI的结构之后，才能有效地改造LAI并且高效地将其应用于CLA的工业生产。 本研究以构建表达植物乳杆菌P-8 LAI的基因工程菌JM109-LAI-pQE30为研究材料，利用vecterNTI、http://smart.embl-heidelberg.de/和http://swissmodel.expasy.org/等在线工具和软件对LAI进行生物信息学分析，预测与酶活性相关的位点，对其进行PCR介导的定点突变，比较LAI在突变前后活性变化，从而确定该位点是否为必需基团，为进一步研究LAI的结构和功能奠定基础。结论如下： （1）通过软件工具对LAI序列进行三级结构的预测，初步确定了5个可能与LAI活性紧密相关的位点，分别为第68位甘氨酸、第107位精氨酸、第125位赖氨酸、第172位组氨酸和第222位酪氨酸。 （2）成功构建了突变体G68A-LAI（甘氨酸突变为丙氨酸）、R107L-LAI（精氨酸突变为亮氨酸）和H172P-LAI（组氨酸突变为脯氨酸）。 （3）与野生型LAI相比，突变体G68A-LAI几乎丧失酶活力，突变体R107L-LAI的酶活力上升，而突变体H172P-LAI的酶活力下降。初步确定第68位、第107位和172位均为LAI的必需氨基酸。