超高效液相色谱法检测奶粉中的水溶性维生素和脂溶性维生素

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随着人们生活水平的提高,牛奶在人们日常生活中越来越重要。近几年,由于国产奶粉食品安全事件的频繁发生,消费者开始对国产奶粉失去了信心。随着经济全球化的到来,洋奶粉逐步在我国高端奶粉市场占据了主导地位。到底国产奶粉的质量如何?这也是此次实验的意义所在。维生素是衡量奶粉质量的一项重要指标,所以本文以多种国产奶粉为实验原料,对奶粉中的维生素的提取和液相色谱法检测条件进行了研究,并对国产奶粉的营养价值进行了分析。实验目的是建立一种简单、快速、少溶剂用量、低样品用量、低成本、环保、自动化且有效可靠的检测奶粉中水溶性、脂溶性维生素含量的分析方法。主要研究成果为:1.本研究首先对选择的4种水溶性维生素标准的超高效液相色谱条件进行了优化。通过比较不同的色谱柱、流动相、流速、柱温、pH值,确定了最优的液相色谱条件:Acquity UPLC BEHC18柱(2.1×100 mm,1.7 μm, Waters公司);流动相为:含有5mM/L的辛烷磺酸钠、0.5%三乙胺、甲醇:2.4%的冰醋酸水溶液(15/85,V/V);流速为:0.3 mL/min;柱温为:40℃;pH值为:3.5。在优化的超高效液相色谱条件下,4种维生素得到了很好的分离、定性和定量,线形良好,相关系数均大于0.999。方法的最低检出限范围为:0.00008-0.00043 mg/L。本实验从提取溶剂的极性强弱以及样品所产生溶剂峰的大小两方面考虑,最终确定了在本实验中用三氯乙酸:水(4/96,W/V)作为提取液,经离心、过滤、三氯乙酸:水(4/96,W/V)定容以及0.45μm的滤膜过滤后上机检测。在回收率实验中,经过优化的超高效液相色谱法的回收率范围为:80.8%-109.0%,相对标准偏差范围为:0.59%-2.54%。2.本研究在对水溶性维生素的超高效液相色谱检测方法的基础上进行了探索,对选择的7种水溶性、脂溶性维生素标准的超高效液相色谱条件进行了优化。水溶性维生素和脂溶性维生素在以下液相色谱条件下得到分离:Acquity UPLC BEH C18柱(2.1×100 mm,1.7 μm, Waters公司);流动相为:含有0.010%(W/V)的三氟乙酸溶液与甲醇(色谱纯),梯度洗脱;流速为:0.2 mL/min;柱温为:40℃;pH值为:4.0。在优化的超高效液相色谱条件下,7种维生素得到了完全分离、定性和定量,线形良好,相关系数均大于0.999。方法的最低检出限范围为:0.0018-0.0120 mg/L。在实验中,从提取溶剂的极性以及样品所产生溶剂峰大小这两方面考虑,最终确定了本实验中0.010%(W/V)的三氟乙酸水溶液:甲醇(50:50,V/V)作为提取液,经离心、过滤、定容以及0.45μm的滤膜过滤后上机检测。在回收率实验中,超高效液相色谱法的回收率范围为:79.0%-109.6%,相对标准偏差范围为:0.61%-2.59%。3.以维生素含量和种类为指标,对不同的国产奶粉进行了评价。由测定结果可知,MN、YL品牌的奶粉不仅在维生素的含量上要高于YX奶粉而且在维生素的种类上也要多于YX奶粉,同时还更为注重针对不同的消费对象添加满足其需求的维生素。
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