指示非二噁英类多氯联苯和植物生长素的新型报告体系的构建

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多氯联苯(PCBs)是一种持久性有机污染物,对动植物和环境都有严重毒害作用。利用生物指示监测PCBs是了解环境污染程度、检测植物修复效果的新手段,具有低成本、精确与高效等优点。PCBs分成二大类,二嗯英类(DL-PCBs)和非二噁英类(NDL-PCBs)。前者结合哺乳动物AHR受体,后者结合PXR受体。用带有哺乳动物AHR受体系统的转基因植物检测二噁英类多氯联苯(DL-PCBs)已有报道。本实验构建了带有哺乳动物PXR受体系统的转基因拟南芥以指示NDL-PCBs。该系统由核受体家族成员PXR、RXR和我们设计的PXR/RXR结合特征序列构成。由18个异源物质应答元件(XREs)组成的启动子重复序列驱动EGFP-GUS报告基因的表达。结果显示:该系统对木脂素、类胡萝卜素和类黄酮等内源性物质并不敏感,也不会被DL-PCBs激活。但是可以有效响应NDL-PCBs,报告基因表达强度依赖于PCBs处理时间与浓度。羟基化PCBs不能激活PXR,而甲基化PCBs仅在高浓度下微弱诱导表达报告体系。此外,维管组织似乎不能有效运输NDL-PCBs。综上,NDL-PCBs报告体系可以作为监测植物吸收和代谢NDL-PCBs的一个有效工具。鉴于该体系可以有效的指示NDL-PCBs,我们通过重叠PCR的方法改造了PXR的配体结合域(LBD),换以生长素受体TIR1结合生长素的结构域,保留其与RXR二聚化功能域,希望能够发展一种新的体系指示生长素的浓度。
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