循环缺血后处理次数对改善残肝缺血再灌注损伤影响的比较分析

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目的:研究不同循环缺血后处理次数对大鼠肝大部分切除后残肝缺血再灌注损伤保护作用的多方面影响。方法:健康清洁级雄性SD大鼠60只,体重230~280g,随机分为6组,PH组:70%肝切除无缺血再灌注组;PHIR组:70%肝切除合并缺血再灌注组;缺血后处理(IPO)组于血管夹完全开放前给予IPO,采用再灌注60s-夹闭60s(60s-60s)循环,根据循环次数分为缺血后处理1组(IPO1):循环2次;2组(IPO2):循环4次;3组(IPO3):循环6次;4组(IPO4):循环8次。于再灌注1h、12h、24h、48h后取各组大鼠静脉血测定血清AST和ALT活性及残肝组织测定丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)水平,于再灌注48h后取残肝组织测定肝细胞凋亡指数及制作病理切片行光镜观察。结果:与PH组相比,PHIR组各时点丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性增高,丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平也增高,而超氧化物歧化酶(SOD)水平明显降低,差异有统计学意义;与PHIR组相比,IPO各组各时点丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性下降,丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平也下降,而超氧化物歧化酶(SOD)水平则上升,在IPO3组和IPO4组其水平变化明显,差异有统计学意义;与PH组比较,PHIR组、IPO各组肝细胞凋亡指数升高,差异均有统计学意义,IPO4组升高程度最低;与PHIR组比较,IPO各组肝细胞凋亡指数下降,IPO4肝细胞凋亡指数下降最为显著;48h观察残肝病理切片可见:与PHIR组相比,IPO各组肝细胞肿胀均有减轻,变性的肝细胞少见,点状及片状坏死的肝细胞均有减少。与PH组比较,IPO组在再灌注48h肝细胞轻度肿胀,偶可见点状坏死。结论:IPO4组MDA、MPO含量下降及SOD活性显著升高程度最为明显,AST、ALT水平影响最小,同时IPO4肝细胞凋亡指数在IPO各组中较PH组比较最小;经60s-60s循环缺血后处理,肝细胞肿胀程度明显减轻,变性坏死范围变小,其中8次循环改善效果最为明显。
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