【摘 要】
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目的:探究丁酸对坏死性小肠结肠炎（NEC）新生鼠肠道炎症的调控作用及其初步机制。方法:3日龄C57BL/6新生鼠被随机分为3组:正常对照组、NEC对照组和丁酸干预组。丁酸干预组新生鼠出生后第3日开始每日被灌胃150 m M丁酸钠溶液（0.03 ml/g）1次,持续7天。NEC对照组新生鼠出生后第3日开始每日被灌胃10 m M磷酸盐缓冲液（PBS）（0.03ml/g）1次,持续7天。丁酸干预组和NE
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目的:探究丁酸对坏死性小肠结肠炎（NEC）新生鼠肠道炎症的调控作用及其初步机制。方法:3日龄C57BL/6新生鼠被随机分为3组:正常对照组、NEC对照组和丁酸干预组。丁酸干预组新生鼠出生后第3日开始每日被灌胃150 m M丁酸钠溶液（0.03 ml/g）1次,持续7天。NEC对照组新生鼠出生后第3日开始每日被灌胃10 m M磷酸盐缓冲液（PBS）（0.03ml/g）1次,持续7天。丁酸干预组和NEC对照组新生鼠均通过缺氧、低温刺激和人工过量饲喂方式创建NEC模型。正常对照组由母鼠饲养。1.评估NEC模型创建:记录三组新生鼠体重及存活率;苏木素-伊红染色和双盲评分法评估回盲肠病理变化。2.分析肠道菌群生物信息学:采用16S r DNA测序法分析三组新生鼠肠道菌群多样性及构成变化。3.评估肠道炎症因子:实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-q PCR）检测肠道组织炎症因子（IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α）m RNA水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肠道组织上清液中炎症因子（IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α）蛋白水平。4.评估肠道炎症信号通路因子:RT-q PCR检测肠组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1）、Toll样受体4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）的m RNA水平;ELISA检测肠道组织上清液中HMGB1蛋白表达;免疫组织化学和蛋白印迹实验相对定性及定量分析肠道组织中TLR4和NF-κB蛋白表达变化。结果:丁酸干预显著提高NEC新生鼠体重及存活率,减轻NEC肠道病理损伤（P＜0.05）。丁酸干预显著提高NEC新生鼠肠道菌群多样性（P＜0.05）。丁酸干预降低NEC模型中机会性致病菌狭窄梭菌属1和肠球菌属相对丰度,增加有益菌厚壁菌门和乳酸菌属相对丰度。丁酸干预降低肠道白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8及TNF-αm RNA及蛋白表达,增加肠道IL-10 m RNA及蛋白表达（P＜0.05）。丁酸干预降低肠道HMGB1、TLR4、NF-κB m RNA及蛋白表达（P＜0.05）。结论:丁酸干预能减轻NEC新生鼠肠道炎症程度,部分纠正肠道菌群紊乱,可能是通过调控HMGB1-TLR4/NF-κB信号通路实现,具体分子机制有待于进一步研究。
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