【摘 要】
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目的本研究主要探索孕期/哺乳期砷暴露对母代鼠学习记忆能力的影响以及增补叶酸的作用,并初步探讨其作用机制。方法C57BL/6雌鼠随机分为四组,分别为对照组（Control组）、染砷组（As组）、叶酸组（FA组）、染砷加叶酸组（As+FA组）。适应性喂养后,雌鼠与雄鼠进行合笼。在查到阴栓后,染砷组和染砷加叶酸组通过饮水进行砷暴露（16 mg/L）,叶酸组和染砷加叶酸组通过饮食增补叶酸（12 mg/kg
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目的本研究主要探索孕期/哺乳期砷暴露对母代鼠学习记忆能力的影响以及增补叶酸的作用,并初步探讨其作用机制。方法C57BL/6雌鼠随机分为四组,分别为对照组（Control组）、染砷组（As组）、叶酸组（FA组）、染砷加叶酸组（As+FA组）。适应性喂养后,雌鼠与雄鼠进行合笼。在查到阴栓后,染砷组和染砷加叶酸组通过饮水进行砷暴露（16 mg/L）,叶酸组和染砷加叶酸组通过饮食增补叶酸（12 mg/kg）,染砷及增补叶酸均连续给药至子代断奶。母代鼠进行孕期称重并记录体重,每组选取同一批次产仔（产仔时间间隔为3天内）的7只母代鼠进行Morris水迷宫实验,以检测母代鼠学习记忆能力,采用氢化物发生-原子荧光法测定母代鼠尿液和脑组织中砷含量,采用ELISA试剂盒检测母代鼠血清叶酸含量,采用尼氏染色法观察母代鼠海马神经元形态学变化,采用电镜观察母代鼠海马超微结构,采用Golgi-cox染色法观察母代鼠海马神经元树突复杂性和树突棘密度,采用试剂盒检测母代鼠脑组织中ACh含量和ACh E活性,采用Western blot检测母代鼠海马BDNF、Synapsin-1和PSD-95蛋白表达水平,采用试剂盒检测母代鼠脑组织中GSH含量、MDA含量以及SOD活性,采用Western blot检测母代鼠海马SOD1、SOD2、NOX4、总Nrf2、核Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平,采用免疫荧光进一步观察母代鼠海马区域Nrf2表达情况。结果水迷宫结果显示,染砷组母代鼠第6天逃避潜伏期较对照组上升,染砷加叶酸组第6天逃避潜伏期较染砷组有所缩短。原子荧光结果显示,染砷组和染砷加叶酸组母代鼠脑组织中砷含量相较于对照组和叶酸组明显上升。对照组和染砷组母代鼠血清叶酸含量低于叶酸组和染砷加叶酸组。尼氏染色显示,染砷组母代鼠海马DG区除神经元细胞外,还有较多非神经元细胞存在,其他三组母代鼠海马DG区非神经元细胞数量略少于染砷组。电镜结果显示,染砷组母代鼠突触结构较对照组模糊,突触间隙增宽,线粒体嵴断裂,染砷加叶酸组较染砷组有所好转。Golgi-cox染色显示,染砷组母代鼠海马DG区神经元较对照组复杂性下降、树突棘密度降低,染砷加叶酸组较染砷组有所好转。染砷组母代鼠脑组织中ACh含量、GSH含量及SOD活性较对照组有所下降,染砷加叶酸组脑组织中ACh含量及SOD活性较染砷组有所升高;染砷组母代鼠脑组织中ACh E活性及MDA含量较对照组有所上升,染砷加叶酸组脑组织中ACh E活性及MDA含量较染砷组有所下降。染砷组母代鼠海马组织中BDNF、Synapsin-1、PSD-95、SOD1、SOD2蛋白表达水平较对照组下降,染砷加叶酸组BDNF、PSD-95、SOD2蛋白表达水平较染砷组有所回升;染砷组母代鼠海马组织中NOX4、NQO1、HO-1和核Nrf2蛋白较对照组上升,染砷加叶酸组NOX4、NQO1、HO-1和核Nrf2蛋白表达水平较染砷组有所下降。结论孕期/哺乳期砷暴露可损害母代鼠学习记忆能力,而增补叶酸可改善孕期/哺乳期砷暴露引起的母代鼠学习记忆能力损伤。导致这一结果的机制可能与砷致海马区神经元细胞和突触的形态改变以及致脑组织氧化性损伤有关,而增补叶酸能够保护海马神经元细胞和突触并修复砷导致的氧化性损伤。
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