目的:探究核心钟基因Clock在血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导人脐静脉内皮细胞(Humanumbilical vein endothelial cell,HUVEC)自噬和凋亡中的作用。方法:以HUVEC为研究对象,首先以不同浓度的Ang Ⅱ及不同时间刺激HUVEC,用Western blot和Q-PCR从蛋白水平和转录水平检测自噬相关蛋白和凋亡相关蛋白表达量的变化。脂质体2000转染内皮细胞6 h(下调Clock表达),更换培养基,10-7 mol/L的Ang Ⅱ处理内皮细胞24 h。MTT检测所给浓度的Ang Ⅱ作用24 h时的细胞活力:Q-PCR检测Clock敲降效率和自噬相关基因Atg5,Atg7表达情况;用Westen blot和Q-PCR检测自噬相关蛋白[LC3、Beclin-1(BECN 1)、p62]和凋亡相关蛋白[Bax、Caspase-3、Bcl-2]表达量的变化。结果:1.自噬方面的结果:1.1 Ang Ⅱ(10-7 mol/L)作用 24 h 时,可促进 HUVEC 的 LC3-Ⅱ/LC3-I、BECN1的表达量增加而p62表达量减弱;所给浓度的Ang Ⅱ可引起HUVEC自噬。1.2 Clock基因敲降在蛋白及转录水平均可降低血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞的自噬水平。2.凋亡方面的结果:2.1 Ang Ⅱ(10-7 mol/L)作用 24 h 时,可促进 HUVEC 的 Bax、Caspase-3 表达量增多而Bcl-2表达量降低;所给浓度的Ang Ⅱ可引起HUVEC凋亡。2.2 Clock基因敲降在蛋白及转录水平均可降低血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞的凋亡水平。3.MTT实验转染组与control组相比,吸光度值没有显著性差异,内皮细胞转染脂质体2000-Si-34对细胞生存活性没有明显影响。结论:1.血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞自噬和凋亡;2.Clock基因敲降不影响血管内皮细胞活性;3.Clock基因敲降可下调血管紧张素Ⅱ所致的血管内皮细胞自噬和凋亡。