基于iTRAQ技术对印度梨形孢增强植物黄萎病抗性机制的研究

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我国是世界最大的蔬菜生产国和消费国,各类蔬菜在国民生活和经济上占用重要地位,黄萎病是主要由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的土传维管束病害。大丽轮枝菌具有致病力强、宿主范围广存活时间长等特点因此黄萎病的防止一直是各类蔬菜生产中的重大难题。1998年,印度科学家Verma等人首次发现并命名印度梨形孢(Piriformospora indica),已有的研究表明印度梨形孢在植物促生和抵抗多种植物病害方面都有着显著的作用。目前对于黄萎病的研究热门主要是棉花黄萎病,本试验将以棉花为主要研究材料,围绕印度梨形孢提高植物对黄萎病的抗性机制展开研究,以期能得到一套较为完善的体系并应用到各类蔬菜的生产中,以减轻各类蔬菜黄萎病害的发生。在本次研究中,平板对峙实验结果表明,印度梨形孢可以体外抑制大丽轮枝菌的生长;而印度梨形孢和大丽轮枝菌共侵染陆地棉TM-1的实验结果表明,经过预接种印度梨形孢的棉花,黄萎病发生的频率和程度都有明显的降低。棉花根系总蛋白iTRAQ实验结果表明,在所有鉴定到1069个蛋白中,棉花根系的蛋白表达情况存在着较大差异。对其中104个可信差异蛋白进行组学分析,结果表明104个蛋白共富集到38个GO条目中,KEGG结果表明,104个差异蛋白共富集到64条代谢通路中。为了进一步验证基因的表达情况,选择了α亚麻酸代谢通路中4个基因和与抗病功能相关的4个基因进行qRT-PCR检测,发现其中7个基因在转录层面和蛋白层面表达情况相一致,但表达量存在明显区别,推测可能是因为蛋白的翻译后修饰造成的。上述研究结果表明,印度梨形孢在增强棉花黄萎病抗性方面有着显著的作用,印度梨形孢的定殖可以影响植物α亚麻酸的代谢途径进而影响JA的生物合成,同时还可以影响一些抗病相关基因的表达。整体而言,植物抗病是一个复杂的过程,印度梨形孢可以增强植物对黄萎病抗性的机制还有待进一步的探究。
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