碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein. ChREBP)是调节糖酵解脂肪酸从头合成的重要核因子之一,它能通过调控糖酵解和脂肪酸合成通路上的关键基因来调节细胞内糖、脂代谢平衡。本试验以四川白鹅肝脏组织为材料,采用RACE技术扩增ChREBP的cDNA全序列,运用实时定量PCR技术检测ChREBP mRNA的组织表达特性、四川白鹅和朗德鹅填饲14天后肝脏中的表达量及肝脏TG、血浆参数的变化；在细胞水平上,用不同浓度葡萄糖、胰岛素和LXR激动剂T0901317培养鹅原代肝细胞,检测ChREBP基因的mRNA表达变化。研究结果如下：(1)通过3’RACE和5’RACE技术,获得了全长为1262bp的鹅ChREBP基因序列。DNAStar软件分析ChREBP基因CDS编码的蛋白质相对分子量为35.62kDa,理论等电点pI为5.36。同源性分析结果显示,鹅的ChREBP基因mRNA序列与原鸡序列相似度为90%,氨基酸序列比对与原鸡的同源性为92%。(2)生物信息学分析表明,鹅ChREBP基因全cDNA序列包含了一段125bp长的5’UTR,一个945bp长,编码314个氨基酸的开放阅读框,一段192bp长的3’UTR(其中包括22 bp的ploy (A)); ChREBP氨基酸序列有17个磷酸化位点,其中Ser位点14个,Thr位点2个,Tyr位点1个；没有N连接糖基化位点,有1个O连接糖基化位点；未发现保守结构域。(3) ChREBP基因主要表达于脂质代谢旺盛的肝脏、腹脂、皮脂和小肠中,特别是在肝脏中的表达极显著高于其他各组织,而在大脑、睾丸及肌肉组织几乎不表达。(4) ChREBP基因在填饲14天后的四川白鹅和朗德鹅肝脏中表达量都有所下降,特别是在朗德鹅肝脏中,其表达量显著降低(P<0.05),而在四川白鹅肝脏中的表达下降不显著。(5)填饲14天后,朗德鹅ChREBP mRNA的表达丰度与血浆葡萄糖、胰岛素及肝脏内甘油三酯(TG)都表现出一定程度的负相关,特别是与肝内TG和血浆胰岛素呈显著负相关(P<0.05)。而在四川白鹅中,除血浆葡萄糖与表达呈现正相关外,其余指标负相关,且都不显著。(6)用MTT法检测细胞活性发现：葡萄糖浓度为30 mmol/L时,能有效促进鹅肝细胞活性(P<0.05)。5 mmol/L的葡萄糖、50 nmol/L的胰岛素对细胞活性没有影响,胰岛素浓度增加到100和150 nmol/L时,细胞活性随之上升。200 nmol/L胰岛素抑制鹅肝细胞活性。0.01、0.1、1和10μmol/LT0901317均能显著促进细胞活性。(7)低浓度葡萄糖组(5 mmol/L)对胞内TG含量影响不明显,高浓度葡萄糖(30 mmol/L)显著增加胞内TG的积聚(P<0.05)。而低浓度的胰岛素对胞内TG没有影响,当胰岛素浓度达到200 nmol/L时,胞内TG含量显著降低。T0901317浓度为0.01μmol/L时对胞内TG含量影响不明显,随浓度的升高而胞内TG积聚显著增加(P<0.05)。(8)葡萄糖、胰岛素和T0901317对鹅肝细胞中ChREBP基因表达变化明显,与对照相比,在5 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖处理下,ChREBP表达量都显著升高,ChREBP的表达量分别为对照的7.7倍(P<0.01)、8.3倍(P<0.01)；在50 nmol/L、100 nmol/L、150 nmol/L和200 nmol/L胰岛素处理下,ChREBP的表达量分别为对照的2.41倍(P<0.01)、2.69倍(P<0.01)、3.10倍(P<0.01)、1.68倍(P<0.05)；在0.01、0.1、1和10μmol/LT0901317处理下,ChREBP的表达量分别为对照的2.86倍(P<0.01)、4.19倍(P<0.01)、4.4倍(P<0.01)、7.02倍(P<0.01)。