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前言 系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性结缔组织病，流行病学研究认为遗传因素在SLE发病过程中起重要作用。与SLE易感性相关的基因一般都与病程中的免疫环节有关。 在SLE病人中性粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的致炎作用得到充分重视，已有G-CSF引起血管炎的报道。G-CSF还能调节免疫活性细胞的功能，促使T细胞向Th2表型转化；也能促进B淋巴细胞的增生和免疫球蛋白产量增加；能以自／旁分泌方式使正常的T、B淋巴细胞，B淋巴细胞白血病细胞免于凋亡，G-CSF与肾炎（包括LN）、蛋白尿间可能存在相关关系。G-CSF可能广泛地参与了免疫炎症性疾病，包括SLE、LN的发病过程。有证据表明G-CSF-R可能也存在异常并参与了SLE发病。在NZW×NZB F1鼠中发现G-CSF-R基因与鼠SLE易感性相关及该受体基因的异常表达。基于以上研究基础，我们利用PCR-SSCP方法进行了G-CSF-R单核苷酸多态性与SLE易感性、LN相关性的研究。 材料和方法 1．实验试剂、材料及仪器 PCR反应体系、Taq酶、引物，Tris碱及聚丙烯酰胺等；离心机、PE9600PCR扩增仪、琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶电泳槽。 2．研究对象 符合1982年美国风湿病学会诊断标准的SLE 144例，其中女性131例，男性13例，年龄为12－69岁。正常对照组：489名健康献血员，均符合卫生部制定的“供血健康检查标准”，其中女性435例，男性54例，与SLE组年龄相当。分别符合各自临床诊断标准的其它免疫性疾病85例。原发性肾小球肾炎28例。 3．临床及实验室资料 来源于我院病例记载和实验室化验结果。 4．实验方法 4．l 标本采集 4．2 血浆分离及白细胞提取 4．3 饱和酚一氯仿法提取DNA 4．4 测序 45 全部试验对象DNA样品PCR反应 根据测序结果设计新的引物以进行热启动PCR反应；用2％琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物。 4．6 G－CSF－R扩增片段的单链构像多态性（SSCP）分析 5．以上统计分析采用SPSS软件 结 果 l．G－CSF－R基因第5内含子区域核耷酸（nt乃肠位点存在单核着酸多态性。测序结果提示共有三种基因型：A．A／G杂合子型，B．A／A纯合子型，C．G／G纯合子型。 2SLE组与对照组比较，各基因型分布构成的差别有统计学意义，x’习．431，P＝0．001。SLE病人中 A／G基因型的频率明显高于对照组O＝0．002入 A／A基因型的频率明显低于对照组厂一0．0001人而 G／G基因型的频率在两组间无显著差异K二 0．157＊冷和 G等位基因的阳性率在两组间的差异有显著性（P二 0．001人A等位基因的频率明显低于对照组石等位基因的频率明 ·2·显高于对照组。 3．各基因型在各临床表现，各临床检验结果中的阳性率均无显著差异什＞o．防火 4．Keldall’S相关分析浙A／A基因型与蛋白尿程度相关（、＝0．249，P二 0．049）。 讨 论 本研究首次发现中国北方汉族人G－CSF－R基因第5内含子9606位点存在单核着酸多态性乃NPL并存在3种基因型9606A／G，9606 A／A，9606G／G。统计学资料提示该SNP与SLE易感性相关，G－CSF—R基因可能是SLE的易感基因。本研究结果与外国学者的结论相符合。G—CSF－R可能存在数目、结构、信号传导方面的异常，在SLE发病中有重要作用。G－CSF的所有功能都是通过其与受体结合发挥出来的，所以研究G－CSF－R异常表达在SLE发病中的作用，就要研究G－CSF与SLE的关系。在SLE病人中G－CSF的致炎作用得到充分重视。一般认为下列因素可能是G—CSF引起狼疮发作，血管炎发生和狼疮脑病加重的原因：仅比一CSF诱导中性粒细胞迅速增多，多形核白细胞（PMN）的代谢和功能上调。其中粒细胞的吞噬作用增强明显。o晚疫复合物和补体能激活 PMN，在这样的背景下人一CSF增加 PMN的数量能导致血管炎的发作。O瓜一CSF－R在调节PMN活性方面有重要作用，受体异常能够引起中性粒细胞活性的改变。另外人一CSF改变了Thl／ThZ平衡的方向，能直接作用于B淋巴细胞上促使免疫球蛋白产量增加。总之，G－CSF对体液免疫的促进可能参与了SLE的发病，这与我们的实验结果相符合。 然而有许多报道认为SLE的发病是由hl型细胞主导的。出现这种不一致的原因可能是O）实验方法和细胞类型选择的区 ·3·别。K）在SLE发病过程中T细胞的激活和细胞因子的分泌，可能分为2个阶段，即首先表达hl型细胞因子，之后才有o细胞因子的表达。o)细胞因子网络失衡参与SLE致病过程，可能有我们未发现的因素（包括细胞因子）参与到SLE发病中。 自身反应性TJ淋巴细胞通过凋亡途径的去除在维持外周免疫耐受中有重要意义。一般认为人类SLE患者的外周血淋巴细胞凋亡水平可能也是降低的，在SLE发病中起一定作用。推测G－CSF可能在淋巴细胞凋亡的过程中发挥作用而参与SLE发病。 本研究与姜亦等人在?