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目的: 研究食管鳞癌(ESCC)组织中miR-17-92簇(miR-17a，miR-18a，miR-19a，miR-20a，miR-19b和miR-92a)的表达水平以及细胞和血清中miR-17-92簇成员miR-18a的表达水平，探讨miR-17-92簇的表达差异与ESCC患者临床病理特征、p53蛋白的表达状况及预后的相关性，从而评估miR-17-92簇成员的表达水平能否作为ESCC诊断及预后评估的miR-17-92簇成员的表达水平能否作为ESCC诊断及预后评估的指标。 方法: 1.在2008年2月和2010年10月期间收集105例行食管癌根治术后患者的手术标本（食管癌组织和肿瘤远处大于5cm处正常食管上皮）。所有患者术前未行放化疗，将收集到的样本存放在液氮储存中。提取总RNA后应用poly A加尾法进行反转录反应。应用实时定量荧光PCR法检测105例ESCC组织及相应癌旁正常组织的miR-17-92簇各成员的表达水平。 2.应用免疫组化法检测上述105例病例中的96例ESCC组织中p53蛋白的表达情况。结合miR-17-92簇各成员的表达情况，分析p53蛋白的表达与miR-17-92簇各成员表达的相关性。 3.选用KYSE510、EC1、TE13、KYSE1170、Eca109、EC1及EC9706六株人食管鳞状上皮细胞癌细胞株和HEEpiC食管正常上皮细胞株，应用实时定量荧光PCR法检测miR-17-92簇成员miR-18a的表达在各细胞株间的表达水平。 4.选取2008年2月至2010年1月期间在浙江省肿瘤医院接受食管切除术(R0或R1）的67例ESCC患者，术前和术后7天采集血清样本。采集45位健康志愿者的血清作为对照。应用茎环法进行反转录反应，特异性高的Taqman探针法检测血清miR-17-92簇成员miR-18a的表达变化。 5.统计分析:以小核苷酸RNA U6(RNU6B)为内参，我们采取2-ΔΔCT法比较目标miRNA在食管鳞癌和正常食管组织之间的表达差异。Wilcoxon符号秩和检验来分析在食管癌组织中的miR-17-92基因簇的表达与正常食管上皮之间的相关性。采用Fisher精确概率检验或x2检验进行miR-17-92基因簇的表达与临床病理因素、p53蛋白表达水平之间的相关性分析。采用Kaplan-Meier法和Cox比例风险进行无进展生存期和总生存期评估，以确定的miR-17-92基因簇表达的预后价值。使用Mann-Whitney检验比较癌症组和健康组血清miRNA浓度及miRNA比值的差异，使用Wilcoxon检验比较食管切除术前及术后7天的配对血清样本。P＜0.05表示显著性差异。根据受试者工作特征ROC曲线和曲线下面积(AUC)评估血清miRNA浓度用于ESCC检测的可行性。 结果: 1.MiR-17-92簇的6个成员在105例食管癌患者的癌组织中相对于正常组织均为高表达(P＜0.05)。所有的患者按照目的miR-17-92簇的各成员表达的水平，被分为两组，即高表达组和低或正常表达组。其中miR-18a的高表达与分化程度呈负相关(P=0.025)。同时，miR-92a的表达水平与临床分期呈正相关(P=0.022)。而miR-19b的高表达与肿瘤大小(P=0.005)，临床分期(P=0.011)均呈正相关的。另外，miR-17a的过表达与淋巴结转移(P=0.035)和临床分期(P=0.022)呈正相关。而miR-19a的表达，与脉管浸润(P=0.038)呈正相关。而miR-18a，miR-17和miR-19a均可作为不良预后的危险因子。 2.在miR-17-92簇各成员中，仅miR-18a的表达与p53蛋白表达情况显著相关。在miR-18a的高表达组中，p53蛋白高表达率为62.7％，而在miR-18a的低表达或正常表达组中，p53蛋白高表达率为37.8％。 3.MiR-18a在两株高分化ESCC细胞株(EC9706，Eca109)中的表达较正常食管上皮细胞株HEEpiC低，在另一株高分化的食管癌细胞株KYSE510表达稍增高，约1.61倍。而在三株低分化的食管癌细胞株TE13，KYSE1170，EC1中，miR-18a的表达明显增高。 4.ESCC患者血清miR-18a的浓度显著高于健康志愿者(P＜0.05; ESCC患者 vs健康志愿者(M±SD):4.26±12.15 vs0.60±0.65 amol fmol/L）。 ROC曲线显示两组间差异较大，AUC为0.903，最佳临界点位于1.065 fmol/L处，灵敏度和特异性分别为86.6％和80.0％。血清中miR-18a表达水平与分化程度相关(P=0.044)，与组织中miR-18a的表达呈正相关。10例ESCC患者血清中miR-18a升高的患者，术后7天的血清中的miR-18a表达较前下降。然而血清中miR-18a的表达与p53蛋白无关。 结论: MiR-17-92簇各成员在ESCC患者癌组织相对于正常食管上皮组织均呈高表达，另外miR-18a在食管癌细胞株和血清中均高表达。MiR-18a在血清中的特异性高表达有望成为食管癌诊断的分子标记物。而miR-18a的表达还与组织的分化水平显著相关，其分子机制有待进一步的研究。MiR-17-92簇的成员miR-18a，miR-17和miR-19a均有望作为预测食管鳞癌不良预后的预测因子。MiR-17-92簇成员中，仅miR-18a在组织中的表达与p53蛋白的表达相关，其余未见明显相关。MiR-17-92簇作为一个致癌作用的miRNA，其具体的作用机制还有待进一步的研究。