【摘 要】
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背景食管癌是常见的消化道恶性肿瘤,其发生、发展涉及到多分子、多阶段、多因素的调控过程,尽管目前食管癌的各种诊断及治疗技术不断提升与完善,但大多数临床上确诊的食管癌患者生存期不超过1 a,5 a生存率极低[1]。因此,积极探索影响食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的相关机制,有望改善食管癌患者的预后,为食管癌的治疗提供新的思路。RCAN1(regulator of calcineurin 1 gene,RC
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背景食管癌是常见的消化道恶性肿瘤,其发生、发展涉及到多分子、多阶段、多因素的调控过程,尽管目前食管癌的各种诊断及治疗技术不断提升与完善,但大多数临床上确诊的食管癌患者生存期不超过1 a,5 a生存率极低[1]。因此,积极探索影响食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的相关机制,有望改善食管癌患者的预后,为食管癌的治疗提供新的思路。RCAN1(regulator of calcineurin 1 gene,RCAN1)是发现于人类21号染色体上的新兴基因,在人体内有3个转录本,即RCAN1.1、RCAN1.2、RCAN1.4。大量研究发现,机体内多种恶性肿瘤的发生发展都与RCAN1.4转录本有关。但RCAN1.4在食管癌中的作用及分子机制尚未完全明确。我们旨在探索RCAN1.4对体外食管癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,以期为食管癌的分子靶向治疗提供依据。目的探讨钙调磷酸酶调节因子1.4(RCAN 1.4)对食管癌KYSE 30细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法1.应用慢病毒感染食管癌KYSE30细胞,构建RCAN1.4干扰稳转细胞系,采用实时荧光定量PCR及Western Blots方法检测细胞内RCAN1.4mRNA及RCAN1.4蛋白表达水平,验证RCAN1.4的干扰效率。2.应用平板克隆实验、Wound-healing实验、Transwell小室实验分别检测干扰RCAN1.4表达对食管癌KYSE30细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果1.实时荧光定量PCR实验结果显示,干扰表达RCAN1.4的KYSE30细胞(shRCAN1.4组)内的RCAN1.4mRNA表达水平显著低于阴性对照组(shNC组),差异有统计学意义(P<0.05)。2.Western Blots实验结果显示,干扰表达RCAN1.4的KYSE30细胞(shRCAN1.4组)内的RCAN1.4蛋白表达水平显著低于阴性对照组(shNC组),差异有统计学意义(P<0.05)。3.平板克隆实验结果显示,shRCAN1.4组KYSE30细胞的克隆形成数显著高于shNC组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.Wound-healing实验结果显示,shRCAN1.4组KYSE30细胞的划痕愈合能力显著高于shNC组,差异有统计学意义(P<0.05)。5.Transwell小室实验结果显示,shRCAN1.4组KYSE30细胞的侵袭数显著高于shNC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调食管癌KYSE30细胞中RCAN1.4基因的表达可显著增强细胞的增殖、迁移和侵袭能力,RCAN1.4基因可能参与了食管癌的发生、发展过程。
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