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花生是世界上重要的油料和经济作物,中国是世界上最大的花生生产、消费和出口国。花生野生种具有栽培种不具备的优良性状,是改良花生栽培种的重要基因资源。 本研究主要内容包括:⑴为了导入和利用野生花生的优异基因,改良花生栽培种,本研究以前期创制的栽培种花生和二倍体野生种种间杂种F1为基础,对其中的6个种间杂种F1染色体加倍,建立了一种有效的染色体加倍方法,即利用MS+0.1 mg L–1 NAA+0.4 mg L–16-BA+3%蔗糖+0.05%秋水仙素固体培养基处理杂种F1组培苗的上部茎段,获得双二倍体试管苗的染色体加倍方法。并利用该方法成功获得了两个双二倍体AmE-4和AM1210。⑵为了准确鉴定AmE-4和AM1210的染色体组成,本研究综合利用分子标记、GISH/FISH以及寡聚核苷酸带型技术鉴定了加倍后的植株,结果显示AmE-4和AM1210染色体数均为60,且均包含了其父母本的染色体,证实了AmE-4和AM1210为双二倍体。⑶为了能够追踪和鉴定外源染色体,本研究以双二倍体及其父母本为模板进行分子标记筛选,最终获得了57个和69个能特异追踪双二倍体AmE-4中A. oteroi和AM1210中A. duranensis的染色体(片段)的显性共显性标记。为能够后续创制和鉴定AmE-4和AM1210的外源染色体变异系奠定了分子基础。⑷为了进一步了解双二倍体AmE-4和AM1210遗传特性,研究通过比较双二倍体与栽培种植株性状遗传差异,揭示了两个双二倍体的遗传特性,为下一步研究利用A. oteroi和A. duranensis优异基因提供了参考。此外,研究又进一步通过AM1210与栽培种回交获得了50条染色体的后代,为下一步创制外源添加系、代换系和小片段易位系奠定了材料基础。