【摘 要】
：
目的:铁皮石斛（Dendrobium officinale）为兰科植物铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的干燥茎,其神奇独特的药用价值深受历代医家推崇,现代研究表明,铁皮石斛主要含有多糖、氨基酸、微量元素、生物碱等多种化学成分,而多糖作为其主要活性成分,具有改善胃肠炎症、降血糖、调节免疫等作用。多糖具有的多种生物活性与其结构密切相关,不同的结构其活
论文部分内容阅读
目的:铁皮石斛（Dendrobium officinale）为兰科植物铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的干燥茎,其神奇独特的药用价值深受历代医家推崇,现代研究表明,铁皮石斛主要含有多糖、氨基酸、微量元素、生物碱等多种化学成分,而多糖作为其主要活性成分,具有改善胃肠炎症、降血糖、调节免疫等作用。多糖具有的多种生物活性与其结构密切相关,不同的结构其活性也有一定的差异,多糖的单糖组成、糖苷键的构型、侧链基团及分子量都是影响其活性的主要因素,研究多糖的构效关系现己成为医药领域的热点之一。因此,本文通过制备铁皮石斛多糖（DOP）,对DOP进行分离纯化、结构分析,并以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）为模式生物,研究铁皮石斛多糖抗衰老活性及其机制,以期对其结构与抗衰老活性关系的研究奠定基础。方法:以葡萄糖为标准品,借助苯酚-硫酸法对多糖含量展开测定,指标为铁皮石斛多糖得率,对提取温度、提取次数、提取时间与料液比进行单因素考察,采取正交实验法对水提工艺进行优化;对醇沉时间、醇沉浓度与药液浓度进行单因素考察,采取正交实验法对醇沉工艺进行优化;通过DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱对DOP进行分离纯化,将得到的均一多糖利用TSK G4000 PWXL凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子量的测定;通过离子色谱法、红外光谱法和核磁共振法对分离纯化后的多糖进行结构分析;以秀丽隐杆线虫为模型,通过检测铁皮石斛多糖对秀丽隐杆线虫寿命、生殖能力、抗热应激、抗氧化应激能力及脂褐素的影响研究其抗衰老活性;通过检测铁皮石斛多糖对秀丽隐杆线虫体内活性氧、抗氧化酶含量、DAF-16核定位以及相关衰老基因表达的影响,初步探索其抗衰老作用机制。结果:铁皮石斛多糖最佳提取工艺为:提取温度100℃,料液比1:15,提取时间1.5 h,醇沉浓度85%,药液浓度1:0.8（g/mL）,醇沉时间12h,此工艺下铁皮石斛多糖的提取率为4.1%;DOP经过分离纯化后得到DOP-1、DOP-2两种均一多糖,其相对分子质量分别为3.260×10~5 Da、4.403×10~5 Da;单糖构成均为葡萄糖与甘露糖,其摩尔比分别是 0.246:0.754、0.235:0.765;DOP-1 和 DOP-2 的红外光谱结果显示 DOP-1 和 DOP-2均含有多糖的特定吸收峰,均有β-构型的甘露吡喃糖苷键,在构成上是以β-构型为主的吡喃多糖;通过核磁共振对DOP-1进行分析,结果显示DOP-1是以β-构型为主的吡喃型葡甘露聚糖,其残基片段主要为（1→ 4）-β-D-Manp、（1→4）-β-D-Glcp和2-O-acetyl-（1→4）-β-D-Manp;通过抗衰老活性实验发现,DOP-1可以延长秀丽隐杆线虫寿命,提高线虫抗热应激和抗氧化应激能力,降低线虫体内脂褐素积累、降低ROS和MDA的含量,增加线虫体内SOD、CAT活性,促进DAF-16核定位,并升高线虫体内daf-16和其下游靶基因sod-3和hsp-16.2的表达水平,降低daf-2和age-1的表达水平,升高sir-2.1的表达水平,推测DOP-1可能是通过ⅡS通路和饮食限制通路调控秀丽隐杆线虫抗衰老相关基因的表达,促进DAF-16入核表达,增加抗氧化酶活力,并降低体内MDA含量、ROS和脂褐素的积累,提高线虫抗应激能力从而使线虫寿命延长。结论:本文通过对铁皮石斛多糖的提取工艺进行优化,优化后的提取方法操作简单,多糖得率较高;对铁皮石斛多糖DOP的分离纯化、结构分析和抗衰老活性进行了初步研究,并探讨了铁皮石斛多糖DOP-1抗衰老活性的可能机制,所获得的实验结果对铁皮石斛多糖的开发应用具有一定借鉴意义。
其他文献
大量冠心病中医证候的流行病学调查显示,气虚血瘀证是其最常见的类型。冠心病中医证型诊断标准中多有对气虚血瘀证辨证加以规范,具备一定的临床指导意义。然其多立足于宏观指标论述,少数纳入的理化指标也相对滞后,导致标准内容繁琐,证候辨别准确率不高,临床可操作性较差。随着现代医学技术和手段的发展,人们对冠心病以及气虚血瘀证候内在的生物学基础进行了更深入的探索,并意识到客观指标在辨病辨证中的重要性。目前冠心病血
本文第一部分探讨化疗药物由奥沙利铂引起的周围神经毒性及卡培他滨致手足综合征临床特点和病理机制及中西医治疗进行了综述。化疗药物引起的周围神经毒性和手足综合征是当前最普遍的药物副作用,严重影响恶性肿瘤患者的生存质量,甚至有可能导致药物停药或减量。奥沙利铂导致的周围神经毒性表现为四肢麻木、四肢疼痛,及卡培他滨导致的手足综合征造成四肢红肿、疼痛、脱屑、甚至溃疡,这两种化疗不良反应严重影响日常生活行为,探讨
研究目的:分析肺癌骨转移患者发生骨相关事件（skeletal related events,SREs）的危险因素,建立肺癌骨转移患者发生SREs的风险预测模型;探讨中医证型与SREs及SREs独立危险因素的相关性。研究方法:本研究收集2018年3月至2021年3月中日友好医院收治的肺癌骨转移患者确诊骨转移时的年龄、性别、吸烟情况、病理类型、肿瘤分期、东部肿瘤协作组（Eastern Cooperat
研究背景膝关节骨关节炎（Knee osteoarthritis,KOA）是骨科的常见病、多发病,多见于中老年人,其临床表现主要为膝关节的疼痛和功能障碍,严重者会出现关节的畸形,对患者的生活质量造成严重影响,给患者带来很大的痛苦,另外日常的护理和治疗需要耗费大量家庭财力和医疗资源,给家庭和社会带来经济负担不容忽视。流行病学调查显示,全球患有骨关节炎疾病的人数已经超过3亿,在60岁以上人群中,约1 0
脑性瘫痪（Cerebral Palsy,CP）是指大脑发育未成熟阶段由于早产、难产、窒息及黄疸等原因引起的非进行性脑损伤,形成以姿势异常和运动障碍为主的综合征。脑瘫典型特征为肌张力增高,肌肉痉挛可导致肌腱挛缩、关节僵硬,进而发展为关节畸形。髋关节发育异常（髋关节半脱位、脱位）和脊柱畸形（腰椎前凸、脊柱侧弯等）为其常见畸形,给患儿康复训练造成了巨大阻碍,且严重降低了患儿移动能力和生活质量。如何早期预
过饱和自纳米乳递药系统（Supersaturating Self-Nanoemulsifying Drug Delivery Systems,S-SNEDDS）属于脂质递药系统,可通过改善难溶性药物水溶性,维持或延长体内药物的过饱和状态,延长药物在体内作用时间等途经来提高药物的生物利用度。同时,过饱和自纳米乳递药系统可根据不同用途进一步加工制备成其它剂型,如滴眼剂、凝胶剂、片剂等。高良姜素（Gal
背景急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）是冠心病急性心血管事件当中具有代表性的一组疾病,气象因素是其最常见的诱发因素之一。临床实践过程中发现在大风降温天气ACS患者入院率明显增加。将这种现象与“络风内动”病机理论中的“外风引动内风”病机学说联系起来,强调外界环境刺激属于诱发疾病的重要危险因素。基于该理论我们推断气象因素中的风速可能作为“外风”的客观表现形式之一,
苦碟子,来源于菊科苦荬菜属植物抱茎苦荬菜Ixeris sonchifolia（Bunge）Hance.的全草,广泛分布于我国东北、华北、华南和西南地区,味苦、性寒,具有清热解毒、凉血、活血、排脓等功效,主治头痛,牙痛,咽喉肿痛,跌打伤痛,肠炎,阑尾炎,肺脓肿,疮痈肿毒等症状。临床上常用其水提物苦碟子注射液治疗脑梗塞、冠心病、肺源性心脏病、脑出血等心脑血管疾病,尤其对血瘀证兼热证患者疗效显著。苦碟子
目的:中枢神经系统（central nervous system,CNS）疾病是由多种因素导致的脑、脊髓结构或功能损伤,从而引起的一系列疾病,包括神经退行性疾病、脑血管疾病等。由于CNS疾病发病机制复杂,并且血脑屏障的存在极大提高了脑内给药的难度,使得此类药物开发的成功率极低。石榴皮具有多种生物活性成分,并经研究发现具有良好的CNS保护作用,但其发挥CNS保护作用的物质基础和药效机制尚未阐明。对于
1研究目的目前关于甲状腺毒症中医辨证分型研究较少且证候诊断领域的辨证标准尚未统一。因此,本研究结合文献检索、专家咨询与临床研究等方法,借助多元数理统计方法,明确甲状腺毒症的中医证候分布规律,研制一个客观、科学、可行性高的甲状腺毒症中医证候诊断量表,规范其证候诊断,为临床辨证提供一种规范化、客观化的研究思路与方法,为甲状腺毒症中医/中西医结合类临床指南或行业标准的制定提供循证医学证据。2研究方法2.