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表观遗传调控是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下,基因功能发生了可遗传的变化,并最终导致了表型的变化。表观遗传调控的主要机制是组蛋白的乙酰化修饰,其可参与调节许多细胞过程,包括转录、染色质重塑、细胞周期、细胞分化和DNA损伤及修复。溴结构域（Bromodomain,BRD）是组蛋白中乙酰化赖氨酸的“Reader”,是唯一可以识别并结合组蛋白乙酰化赖氨酸的蛋白结构域。现已知在人类基因组中存在61种溴结构域编码,它们存在于46种不同的蛋白质中。根据结构相似性,溴结构域被分为八个家族。其中,第II家族BRD4蛋白以及第III家族CREBBP蛋白与多种疾病的发生、发展密切相关,已成为多种疾病治疗的新靶点。目前,已有几个针对这两个靶点的化合物进入临床试验阶段。本文通过对BRD4和CREBBP小分子抑制剂的生物活性评价,对其作用机理进行讨论,以此对后续的改造工作提供思路。首先,利用AlphaScreen和TSA实验对组内所合成的BRD4和CREBBP两种蛋白的小分子抑制剂进行筛选。筛选获得的BRD4抑制剂中,化合物W4和W5在蛋白水平上表现出较好的活性。在TSA实验上,ΔTm分别为9.2oC和9.9oC。化合物W5对第II家族以外的蛋白没有活性,表现其良好的选择性。所测试的CREBBP小分子化合物中,化合物Q4在蛋白水平上表现出最好的蛋白活性。在CREBBP和EP300蛋白上ΔTm均为11.5oC。其次,在多种癌细胞上对这三个化合物进行增殖抑制活性测试。利用CellTiter–Glo发光试剂测试,得到它们在多种癌细胞上的IC50值。结果显示,化合物W4、W5及Q4可抑制多种癌细胞的增殖。其中化合物W5和Q4均可显著抑制AR阳性前列腺癌(VCaP,IC50分别为0.29μM和0.43μM)和白血病细胞(MV4;11,IC50为0.40μM和0.24μM)的增殖;同时W5和Q4也显著抑制前列腺癌细胞（22Rv1）的克隆形成和细胞迁移过程。其中,W5在1μM时能显著抑制细胞迁移（抑制率为77%）。qRT-PCR实验中,Q4在5μM的浓度下对前列腺癌细胞（VCaP）中对ERG、MYC和PSA基因的转录有明显的抑制作用。接下来通过Western blot分析了化合物Q4对前列腺癌细胞22Rv1中的AR、AR-V7及C-MYC表达的影响。实验结果显示,用16μM化合物Q4处理22Rv1细胞后,C-MYC的表达受到了明显的抑制。综上所述,本研究筛选获得了有效的BRD蛋白小分子抑制剂,并考察评价其在血液性肿瘤白血病和实体瘤前列腺癌,乳腺癌上的生物学活性,探索其作用机制,为后续BRD小分子抑制剂的发现和设计提供了理论基础。