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背景：肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，尤其是在中南亚地区和中国。TSLC1是一种新的肿瘤抑制基因，越来越多的研究表明其在多数肿瘤细胞中表达缺失，其中也包括肝癌。Survivin属于凋亡抑制蛋白家族成员之一，已有研究表明肝癌的发生与该基因过表达有着密切的关系，在肿瘤的发生时Survivin的过表达能够明显抑制肿瘤细胞凋亡，促进细胞异常增殖。近几年来，腺病毒被公认是一种具有潜在价值的肿瘤基因治疗载体。由于在许多肿瘤中都存在Rb/E2F信号通路的异常，而E1A蛋白是腺病毒癌基因产物之一，它可以和Rb蛋白结合使其失活，使肿瘤细胞异常增殖，病毒大量复制，突变腺病毒E1A基因得到靶向性更好的溶瘤腺病毒。 目的：利用靶向基因-病毒治疗策略探究TSLC1对肝癌细胞的杀伤效果及其机制。 方法：利用基因工程技术删除腺病毒早期基因E1A CR2区的24bp碱基以靶向Rb/E2F信号通路异常的肿瘤细胞，利用肿瘤特异性的Survivin启动子来调控腺病毒在肿瘤细胞中特异性复制，并携带肿瘤抑制基因TSLC1，构建成重组溶瘤腺病毒,简写为S24-TSLC1和对照病毒,简写为S24。首先在HEK293细胞中大量扩增这两种重组溶瘤腺病毒,通过氯化铯梯度超速离心法纯化病毒,并测定纯化后病毒的滴度；用Western Blot实验检测重组病毒S24-TSLC1和对照病毒S24在肝癌细胞中的增殖及外源基因TSLC1的表达情况；通过结晶紫染色实验，观察重组溶瘤病毒对肝癌细胞的杀伤效果和对肝正常细胞的毒性；流式细胞术检测重组溶瘤病毒诱导肝癌细胞凋亡的能力；然后再利用Western Blot实验检测重组病毒S24-TSLC1是否通过激活caspase信号通路诱导肝癌细胞凋亡；利用肝癌细胞SMMC-7721皮下注射免疫缺陷的雌性裸鼠，构建荷瘤模型，并用重组病毒S24-TSLC1和对照病毒S24进行治疗，统计肿瘤体积的抑制情况和治疗后荷瘤裸鼠的存活率；通过免疫组化（IHC）和TUNEL染色探究重组S24-TSLC1在动物体内的增殖，表达外源基因以及诱导肿瘤细胞凋亡的情况；最后解剖各个治疗组的裸鼠，观察肿瘤的肝转移情况。 结果：氯化铯梯度离心纯化所得的溶瘤腺病毒约1ml，滴度达1010pfu/ml。重组溶瘤腺病毒S24-TSLC1可以有效地在Survivin阳性表达的肝癌细胞中复制并表达外源基因TSLC1，且对肝正常细胞QSG-7701的毒性较小。流式细胞仪检测发现重组溶瘤病毒S24-TSLC1诱导肝癌细胞SMMC-7721、Hep3B的凋亡率分别为17.04％、14.634%，高于对照病毒S24处理组的3.027%、3.02%（p﹤0.05）。S24-TSLC1激活了caspase信号通路诱导细胞凋亡。在肝癌细胞SMMC-7721荷瘤免疫缺陷的裸鼠模型实验中，目的病毒S24-TSLC1能够抑制肿瘤的生长，与对照病毒S24相比差异显著（p﹤0.05）。组织病理实验结果表明，在裸鼠体内重组溶瘤病毒S24-TSLC1能够大量增殖并表达TSLC1蛋白，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤的生长和转移。在治疗后的第45天，重组溶瘤病毒S24-TSLC1处理组的荷瘤裸鼠存活率为57%，明显高于对照病毒治疗组的29%和PBS处理组的14%。 结论：重组溶瘤腺病毒S24-TSLC1具有靶向性的抗肿瘤效果，是一种很有前景的临床抗肿瘤药物。