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以我国北方工厂化养殖的主要养殖鱼类大菱鲆幼鱼(Scophthalmus maximus L.)为实验对象,以探究饲料中胆固醇及其与磷脂的交互作用对大菱鲆幼鱼摄食、生长和胆固醇代谢的影响。本文主要研究内容和结果如下: 1.饲料胆固醇对大菱鲆幼鱼摄食、生长和胆固醇代谢的影响 本实验以大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼鱼(初始体重5.18±0.01g)为实验对象,进行为期10周的养殖实验以探究饲料中添加胆固醇对大菱鲆幼鱼摄食、生长和胆固醇代谢的影响。向基础饲料中添加0.0%、1.0%、1.5%和2.0%的胆固醇,制作成5种等氮等脂的饲料,饲料中胆固醇的最终含量分别为0.38%、0.76%、1.30%、1.80%和2.22%。本实验中,以胆固醇含量为1.30%、1.80%和2.22%饲料饲喂的大菱鲆幼鱼增重率(WGR)显著高于以胆固醇含量为0.38%饲料所饲喂的大菱鲆幼鱼,但是在胆固醇含量为1.30%、1.80%和2.22%饲料处理组中,大菱鲆幼鱼的WGR并没有显著差异。在所有处理组中,大菱鲆幼鱼的摄食率也没有出现显著的差异。随饲料胆固醇含量的提高,血清中的总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)都表现出上升的趋势,但是都在饲料胆固醇含量为1.30%至1.80%时趋于平稳。从肝脏和粪便TC结果可以看出,只有粪便TC随饲料胆固醇的提高表现出上升的趋势。本实验用实时定量PCR(qPCR)方法检测了肝脏中合成胆固醇关键酶HMG-CoA还原酶和由胆固醇合成胆汁酸的关键酶CYP7A1的相对表达量,结果表明,随饲料胆固醇含量的增加,肝脏HMG-CoA还原酶的表达被抑制,但CYP7A1的表达被显著提高。同样用qPCR检测了肠和脑Ghrelin的表达情况,结果显示,两个组织各处理组之间都没有显著差异。总之,饲料中添加适宜的胆固醇有利于大菱鲆幼鱼的生长,然而促摄食的效果却非常有限。大菱鲆体内存在胆固醇负反馈调节机制以维持胆固醇在体内的平衡。 2.磷脂和胆固醇的交互作用对大菱鲆幼鱼摄食、生长和胆固醇代谢的影响 本实验以大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼鱼(初始体重5.18±0.01g)为研究对象,进行为期10周的养殖实验以探究饲料中磷脂和胆固醇的交互作用对大菱鲆幼鱼摄食、生长和胆固醇代谢的影响。采用3×3的双因素交互实验,向基础饲料中分别添加0、2和4%三种梯度的磷脂,在每个磷脂水平分别设立0、1和2%三种梯度的胆固醇,制成等氮等脂的九组实验饲料。实验结果表明,饲料磷脂和胆固醇对大菱鲆幼鱼的增重率有显著的交互作用(P<0.05),随饲料胆固醇含量的增加,增重率呈现上升趋势,但未对摄食率产生显著交互作用(P>0.05)。磷脂和胆固醇没有对体组成产生显著的交互作用(P>0.05),但随饲料胆固醇含量增加,体脂肪显著上升。同样地,饲料磷脂和胆固醇也未对血清总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯产生显著交互作用(P>0.05),随饲料胆固醇含量增加,这几种胆固醇水平均有明显的上升趋势;但是对于HDL-C和LDL-C这两种运输胆固醇的重要脂蛋白产生了显著的交互作用(P<0.05),一般地,随胆固醇含量的增加,这两种脂蛋白都有上升趋势,而随磷脂含量的增加,两种脂蛋白都有下降的趋势。饲料磷脂和胆固醇对肝脏和粪便总胆固醇均没有产生显著交互作用(P>0.05),随饲料胆固醇含量的提高,肝脏和粪便总胆固醇都呈显著的上升趋势。从HMG-CoA还原酶和CYP7A1酶的表达量情况来看,饲料磷脂和胆固醇均没有对其产生显著的交互作用(P>0.05),HMG-CoA还原酶的表达量随饲料胆固醇含量的增加受到显著抑制,而CYP7A1则受到显著的增强。对于Ghrelin表达量的检测表明,磷脂和胆固醇仅对肠Ghrelin产生了显著的交互作用,而对脑Ghrelin并没有产生显著的交互作用。因此,通过本实验可以得到磷脂和胆固醇对大菱鲆幼鱼的增重率具有显著影响,但是对于摄食率的影响并不显著。在胆固醇代谢过程中,饲料磷脂和胆固醇仅在胆固醇运输方面的HDL-C和LDL-C产生了交互作用,对胆固醇合成关键酶HMG-CoA还原酶和胆固醇降解为胆汁酸过程中关键酶CYP7A1都没有显著的交互作用,表明了饲料磷脂在胆固醇运输过程中具有重要作用。