【摘 要】
：
趋化因子是一类分子量为8-14k Da的小蛋白,与其相应的受体结合后具有控制细胞定向迁移,与多种实体瘤发生、发展密切相关,被认为是恶性肿瘤免疫治疗新的潜在分子靶点。其中CCR9及其唯一天然受体CCL25,在多种实体瘤的研究中逐渐被发现。目前在多种恶性肿瘤组织中发现CCR9高表达,如鼻咽癌、黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌等。此外,在CCR9在肺腺癌组织表达明显增加,且与阳性
论文部分内容阅读
趋化因子是一类分子量为8-14k Da的小蛋白,与其相应的受体结合后具有控制细胞定向迁移,与多种实体瘤发生、发展密切相关,被认为是恶性肿瘤免疫治疗新的潜在分子靶点。其中CCR9及其唯一天然受体CCL25,在多种实体瘤的研究中逐渐被发现。目前在多种恶性肿瘤组织中发现CCR9高表达,如鼻咽癌、黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌等。此外,在CCR9在肺腺癌组织表达明显增加,且与阳性淋巴结转移有关。然而,受限于组织标本采集,CCR9/CCL25高表达并不能应用于对NSCLC患者术前淋巴结转移、P-TNM分期等评估,且CCR9/CCL25生物轴促进癌症转移的的分子机制尚未阐明,极大限制其在临床中的应用。本实验旨在研究CCL25及其下游因子AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白在NSCLC患者术前血清中的表达及其与临床病理因素之间的关系;研究CCR9/CCL25生物轴对NSCLC细胞迁移和侵袭的影响,以及与MMP-2/9的表达和PI3K/Akt通路之间的关系。方法1.选取2014-09至2015-04在广西壮族自治区人民医院行非小细胞肺癌切除+淋巴结清扫术的60例患者作为观察组,选取同期60例健康自愿者作为正常对照组,采用酶联免疫荧光（ELISA）法检测血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9的表达水平,结合患者的临床病理资料,进行统计分析。2.采用Transwell小室迁移侵袭实验观察CCR9/CCL25生物轴对NSCLC细胞迁移和侵袭能力的影响。采用半定量RT-PCR法检测CCR9、MMP-2和MMP-9 m RNA的表达;采用western blot检测p-PI3Kp85、p-Akt、MMP-2以及MMP-9蛋白的表达。结果1.⑴NSCLC患者手术前血清中CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9的表达水平均显著高于健康志愿者（均P＜0.001）;⑵CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9的表达水平与肺癌原发肿瘤大小、淋巴结转移、病理类型和TNM分期等存在相关性（P＜0.05）,与患者性别、年龄等因素无明显相关（P＞0.05）。⑶ROC曲线分析显示NSCLC患者有淋巴结转移的临界值为CCL25=334ng/L,AKT=345 ng/L,VEGF-D=362ng/L,MMP-9=374μg/L;CCL25的敏感度为74.2%,特异度为86.2%;AKT的敏感度为71.0%,特异度为96.6%;VEGF-D的敏感度为90.3%,特异度为96.6%;MMP-9诊断NSCLC的敏感度为71.0%,特异度为89.6%。⑷NSCLC患者术前血清CCL25和AKT水平呈显著正相关（r=0.863,P＜0.001）;CCL25和VEGF-D水平呈正相关（r=0.785,P＜0.001）,CCL25和MMP-9水平显著呈正相关（r=0.881,P＜0.001）。2.我们发现CCR9 m RNA在非小细胞肺癌细胞中广泛表达,CCL25显著促进NSCLC细胞迁移和侵袭（p＜0.001）,伴随着MMP-2和MMP-9蛋白和m RNA表达增加,而Anti-CCR9（100 ng/ml）完全抑制CCL25诱导细胞迁移和侵袭和促进MMP-2、MMP-9表达增加与其相应的对照组相比（p＜0.001）。同样,CCL25诱导PI3K/AKT激活,但这种效应被wortmannin抑制（10 n M,PI3K抑制剂）。此外,wortmannin也可以抑制NSCLC细胞迁移和侵袭和MMP-2 MMP-9的。结论1.临床研究表明:NSCLC患者血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9表达水平显著高于健康对照组表达水平,且与肺癌的肿瘤大小、病例类型、淋巴结转移、临床分期有密切联系,可应用于NSCLC患者的术前早期诊断、发生淋巴结转移风险评估等;此外,研究数据表明血清CCL25与MMP-9、VEGF-D和AKT均高度相关,提示PI3K/AKT通路激活及其下游的效应细胞因子（VEGF-D和MMP-9）的表达有可能受CCR9/CCL25生物轴调节。2.基础实验研究表明:CCR9-CCL25生物轴轴促进NSCLC细胞的迁移和侵袭。此外,研究还表明CCR9-CCL25生物轴诱导细胞迁移和侵袭通过PI3K/AKT通路的激活。因此,CCR9-CCCL25生物轴可能是一个潜在的新型基因靶向治疗非小细胞肺癌。
其他文献
目的:探讨超声引导下椎板后阻滞（Retrolaminar block,RLB）联合塞来昔布治疗非特异性下腰痛（Nonspecific low back pain,NLBP）的有效性及安全性。方法:随机选取50例诊断为非特异性下腰痛的患者参与本次研究,对纳入的患者通过随机数字表分为两组:对照组（C组）25例,以口服塞来昔布（0.2g/次,2次/日,早上、晚上各1次）药物治疗,连续服药2日,期间若患者
目的:了解某乡镇中心卫生院院前急救特点及转诊情况。方法:收集2018年9月至2019年8月某乡镇中心卫生院院前急救的性别、年龄、初步诊断、急救半径、呼救时间、急救干预情况、死亡情况及转诊等资料,使用EXCEL进行数据录入和整理,并进行二次核对。运用SPSS21.0统计软件对数据进行统计分析。根据是否转上级医院,分为转诊组和非转诊组,两组间构成比之间的差异性比较采用卡方检验。以P＜0.05为差异具有
背景:院前急救是急诊救护系统的重要组成部分,快速有效的院前急救对保障患者生命,减少患者的伤残率和致死率至关重要。研究表明,院前急救救护车资源利用可能存在不合理因素,但是目前尚缺乏系统性相关研究。目的:分析广西贵港市院前急救流行病学特征、区域内救护车利用度现状以及院前急救疾病谱构成情况,探讨救护车利用度的可能影响因素,为改善救护车利用度提出建设性意见。方法:收集广西贵港市急救中心2014-2019年
目的:通过Meta分析,系统地评价2型糖尿病病人痴呆的发病与应用口服制剂类降糖药物二甲双胍之间的关系。方法:使用自由词检索联合主题词检索的方法,检索Pub Med、Springer Link、Web of Science、Embase、The Cochrine Liberary、MEDLINE、Weipu Database、CNKI、CBM、Wanfang Database中,有关于将口服二甲双胍
目的运用RT-qPCR方法检测Linc00324在白血病和正常人外周血白细胞中的表达,并比较相对表达量的差异;根据患者的相关临床资料,分析Linc00324的表达水平与临床相关检测指标的相关性,以期明确Linc00324在白血病患者诊断、治疗、预后中的作用。方法1.采集白血病患者外周血白细胞49例,所有白细胞均取自临床表现,细胞形态学、免疫分型、染色体分型确诊的白血病患者。正常对照组为年龄、性别匹
目的:研究2016-2018年玉林市急救中心院前急救流行病学特征和疾病谱变化规律,并进一步分析院前死亡患者的特征,为有关部门制定院前急救策略提供科学依据。方法:收集玉林市120急救中心2016年1月1日至2018年12月31日所有登记在册的院前急救患者的相关数据,采用Excel软件建立数据库,对时间、性别、年龄、诊断等项目进行分类和整理,运用SPSS 23.0进行相关统计学分析,回顾性分析院前急救
目的:了解血D-二聚体在急性缺血性脑卒中早期的水平变化趋势,探讨D-二聚体在基层医院对于急性缺血性脑卒中疾病的筛查价值。方法:选取2019年9月至2020年4月期间因疑似急性缺血性脑卒中在合浦县公馆镇中心卫生院住院并行颅脑CT检查确诊脑梗塞的61例患者为观察组,同时选取同期在合浦县公馆镇中心卫生院进行健康体检的47例健康体检者为对照组,再依据梗死面积将观察组患者分成腔隙性梗组（梗死的横断面最大径＜
目的回顾既往收治的POEMS（polyneuropathy、organomegaly、endocrinopathy、M protein and skin changes）综合征患者的病案资料,探索不同的临床特征分类下的差异性,并总结分析其特征规律,为临床诊疗提供参考。方法回顾性分析2003年1月-2019年8月广西医科大学第一附属医院收治的19例POEMS综合征患者的病案资料。根据POEMS综合征
目的:正常情况下SMP30有七种剪接变异体,但七种变异体在肝细胞癌中表达水平有否区别值得探讨。通过检测肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中SMP30剪接变异体转录情况,对比七种剪接变异体的转录水平差异,了解SMP30在转录水平的选择性剪接作用,有助于探讨SMP30基因在肝癌的发生发展中的作用。方法:（1）分析已经报道的SMP30七种剪接变异体的碱基序列差异,并设计针对每一种剪接变异体的鉴定引物。（2）
目的:利用慢病毒载体（Lentivirus vector,LV）构建人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基（Glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLC）过表达的WRL68细胞株,经微囊藻毒素-LR（Microcystin-LR,MCLR）诱导细胞恶性转化,动态观察细胞的增殖、在体外形成克隆及在裸鼠体内形成肿瘤的变化情况,研究GCLC基因过表达对MCLR