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天然多酚类是主要存在于植物体的皮、根、叶、壳和果肉中的次级代谢物。天然多酚不仅具有抗氧化作用,还具有抑制水肿、血管生成、骨质疏松、炎症,抗肿瘤,促进凋亡和抑制,增加毛细血管抗性,保护心血管、视网膜及控制体重等作用。然而部分天然多酚,尤其是表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和白藜芦醇,由于存在稳定性差,溶解度低,生物利用度低等缺陷而限制其广泛应用。研究发现物理包裹技术是克服这类天然多酚应用瓶颈的具有应用前景的解决方案之一。其中基于多重乳液和自微乳的独特结构和物理化学特性,兼有二者优点的多重自乳化给药系统(SDEDDS)逐渐引起了研究者的广泛关注。随着的研究逐渐深入,发现SDEDDS虽然可有效提高BCSIII类活性物的生物利用度,但是传统的SDEDDS均用于口服且为液态,且剂型单一,通常是封装在胶囊中或为口服液,存在制剂成分与包材存在相容性问题,以及长期贮存后可能发生泄漏或分层的风险,所以研发更为丰富体系满足实际需要成为了一个重要的研究课题。本文研究制备不同应用途径的负载生物多酚(EGCG和白藜芦醇)的多重自乳化给药体系,包括口服和皮肤用的体系,同时选择两种不同的固化策略弥补传统液态体系的不足。具体内容如下:(1)我们首先考察乳液稳定指数、自乳化水平和包封率等因素,优化得到负载EGCG和硫辛酸(ALA)的固态SDEDDS的处方。共聚焦扫描电子显微镜和光学显微镜观察显示固态SDEDDS在水溶液中通过缓慢的搅拌即可形成水包油包水(W/O/W)乳液的多重包裹结构。光稳定性研究显示固态SDEDDS可有效保护EGCG,当固态SDEDDS同时负载EGCG和ALA时,EGCG的光稳定性会进一步增加,EGCG的保留率高到80%以上。长期稳定性考察结果显示固态SDEDDS至少可以稳定保存六个月以上。H202诱导3T3细胞氧化应激损伤模型显示固态SDEDDS水分散液可明显减轻氧化应激引起的损伤,而且负载活性物的SDEDDS没有出现明显的细胞毒性。细胞抗氧化活性实验(Cellular Antioxidant Activity,CAA)显示EGCG和ALA通过固态SDEDDS包裹后依然可以较好的保留抗氧化活性。体外释放研究显示固态SDEDDS的缓释与十六十八醇比例呈高度相关。体外经皮行为研究显示固态SDEDDS分散液可明显增加活性物在皮肤的内的滞留量,而不透过皮肤进入接受池内,而且固态SDEDDS分散液可持续的释放活性物透过角质层进入表皮内。(2)这部分重点研究并制备了口服用固态EGCG-SDEDDS,利用伪三元相图和模拟体外释放优化处方。共聚焦扫描电子显微镜和光学显微镜观察显示固态EGCG-SDEDDS在水溶液中通过缓慢的搅拌即可形成W/O/W乳液的多重包裹结构。长期稳定性考察结果显示固态EGCG-SDEDDS至少可以稳定保存六个月以上。热重分析结果表明分析固态SDEDDS的温度不宜超过95℃,X射线衍射和差示扫描量热结果均表明固态脂质-单硬脂酸甘油酯为高度稳定的β型,固态SDEDDS的脂质基质在室温下呈固态。固态EGCG在SDEDDS中以单个分子的形式溶解在内水相或非结晶形式存在于脂质中。体外细胞转运模型结果表明固态EGCG-SDEDDS主要以依赖小窝介导的内吞穿过Caco-2细胞进入体内的。SD大鼠药代动力学试验表明EGCG经SDEDDS包裹后可明显提高血药峰浓度(Cmax)和口服生物利用度。(3)为了进一步增加活性物的包裹性和含量,以极性有机溶剂(如甘油,乙氧基二甘醇,丙二醇等)取代内水相,通过传统的两步法制备制备负载白藜芦醇的皮肤用非水SDEDDS(trans-res-SDEDDS)。通过荧光显微镜可以观察到trans-res-SDEDDS在水溶液中通过缓慢的搅拌即可形成水包油包油(O/O/W)乳液的多重包裹结构。傅里叶红外光谱结果表明白藜芦醇被完全包裹进入非水SDEDDS中,并没有发生任何化学反应。体外释放研究trans-res-SDEDDS可缓慢持续释放12小时,累积释放可达到80%以上。稳定性考察结果显示EGCG-SDEDDS至少可以稳定保存三个月以上。体外经皮行为研究显示trans-res-SDEDDS可明显增加活性物在皮肤的内的滞留量,而不透过皮肤进入接受池内,并可持续的释放活性物透过角质层进入表皮内。(4)以trans-res-SDEDDS为基础,制备同时负载EGCG和白藜芦醇的口服用液态非水SDEDDS(L-SDEDDS)。进一步通过考察固体粒子的吸附能力和吸附后的溶出度,筛选得到固态非水SDEDDS(S-SDEDDS)。扫描电子显微镜观察发现S-SDEDDS颗粒多孔结构消失。光学显微镜观察发现S-SDEDDS在水溶液中通过缓慢的搅拌即可形成多重包裹结构。傅里叶红外光谱结果表明EGCG与白藜芦醇被完全包裹进入体系中,且没有出现任何化学反应。X射线衍射结果显示活性物在体系中是以非晶体形式包括无定型或单个分子的形式分散在体系中。稳定性考察结果显示S-SDEDDS至少可以稳定保存六个月以上。SD大鼠药代动力学试验表明EGCG和白藜芦醇经SDEDDS包裹后可明显提高Cmax和口服生物利用度。安全性评价结果显示SDEDDS在促进活性物吸收的同时没有对小肠粘膜和Caco-2细胞造成损伤。上述研究共同表明,所制备的负载多酚的多重自乳化给药体系在针对经皮和口服方面具有一定的应用价值。