铁皮石斛（Dendrobii officinalis caulis）是传统名贵中药材，为兰科植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)的干燥茎，铁皮枫斗是以铁皮石斛茎加工炮制的名贵药材。现代医学研究表明铁皮石斛具有抗氧化、提高免疫力、降血糖和降血脂的功效，并已广泛用于抗肿瘤、糖尿病、免疫力低下等疾病的治疗。2010版《中华人民共和国药典》将其作为新增品种从石斛中单列出来，并详细介绍了铁皮石斛的基源、鉴别、检测标准及功效等。但由于铁皮石斛野生资源枯竭和栽培种植成本居高不下，国内药材市场流通着大量由其他石斛属植物加工的枫斗，如紫皮石斛加工的紫皮枫斗等，易与铁皮枫斗混淆，常做伪品充斥其中，而现有的铁皮石斛标准尚不能有效的将它们区分鉴别。本课题在分离铁皮石斛专属性成分基础上，研究铁皮石斛薄层色谱鉴别方法，并基于HPLC、LC-MS、DNA序列分析等方法，对铁皮石斛进行了鉴别研究。　　1.在现有2010版《中国药典》铁皮石斛薄层色谱鉴别方法基础上，对铁皮石斛薄层定性鉴别方法进行了修订研究，通过方法学考察，建立了优化的铁皮石斛薄层色谱鉴别新方法，该方法专属性强，操作简单，重复性好，可有效的将铁皮石斛与易混淆近缘种紫皮石斛区分鉴别。　　2.比较铁皮石斛与紫皮石斛的薄层色谱色谱行为，确定了铁皮石斛专属性成分，并运用MCI柱色谱、凝胶分子筛和制备液相等系统化学分离方法，针对铁皮石斛中的专属性成分进行分离纯化，共分离得到了3个化合物，运用UV、(HR)ESI-MS、1H-NMR、2C-NMR、2D-NMR等光谱技术鉴定了3个碳苷类黄酮成分，分别为佛来心苷、异佛來心苷、牡荆素2"-O-β-D-葡萄糖苷，该化合物均为首次从铁皮石斛中分离鉴定。　　3.以分离鉴定的佛来心苷、异佛來心苷以及夏佛塔苷为铁皮石斛定性鉴别的指标性成分，运用已建立的铁皮石斛薄层色谱鉴别方法，分别对7种石斛枫斗（铁皮枫斗、紫皮枫斗、大包鞘枫斗、刚节枫斗、报春枫斗、水草枫斗、美花枫斗）和8种石斛类药材（铁皮石斛、紫皮石斛、串珠石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、叠翘石斛、來花石斛、兜唇石斛）进行薄层色谱分析，结果显示，所有枫斗和石斛药材都能有效的区分，表明该薄层方法不仅能用于铁皮石斛的定性鉴别，还可以用于石斛属不同来源的枫斗与药材的鉴别。　　4.采用高效液相色谱法建立了铁皮石斛、紫皮石斛的指纹图谱。通过相似度软件分析，生成的铁皮石斛HPLC指纹图谱有15个共有峰，且相似度达到0.873～0.962，而紫皮石斛HPLC指纹图谱相似度达到0.906～0.979。通过主成分分析(PCA)发现，PCA得分图和PLS-DA得分图能够将10批铁皮石斛和10批紫皮石斛有效的区分鉴别。　　5.运用液质联用(HPLC-MS/MS)对铁皮石斛的指纹图谱中的主要化学成分进行指认，通过化合物的保留时间、相对分子质量、二级或多级质谱裂解碎片，确定了铁皮石斛中的26种化学成分，包括14个黄酮类化合物、5个酚酸类化合物和1个木脂素类化合物，其中有4种化合物首次在铁皮石斛中发现。以佛来心苷与异佛来心苷为定性指标，运用LC-MS的方法可将铁皮石斛与紫皮石斛鉴别。　　6.研究建立了铁皮石斛等石斛类药材的DNA提取方法，并基于ITS序列的克隆测序与序列分析对铁皮枫斗等石斛类药材进行了鉴定，通过与Genbank序列数据库进行比对分析，根据ITS序列的相似度程度从12批黄草药材中鉴定出石斛14种，近似种5种;从10批枫斗石斛中鉴定出6种，近似种3种。