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背景:肿瘤是威胁我国人民健康的常见病、多发病。消化道肿瘤在我国恶性肿瘤发病率及死亡率中均居于首位,其中结直肠癌在我国的发病率目前呈逐年上升趋势,传统的治疗方法效果欠佳,如何有效的治疗结肠癌已成为学者专家们研究的重点。Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族的新成员,它可以抑制肿瘤细胞的凋亡,在近乎所有的恶性肿瘤中具有丰富的表达,而在正常组织中不表达。根据这一特性与之相关的肿瘤基因治疗成为当今研究的热点。 目的:探讨研究survivin反义寡核苷酸对结肠癌细胞系HT-29的增殖,凋亡的影响,以及与化疗药的协同作用。 方法:将不同浓度的survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide ASODN)转染结肠癌细胞HT-29,倒置显微镜观察细胞形态变化,用MTT法检测其对肿瘤细胞的抑制率(IR),流式细胞仪检测细胞凋亡的变化情况,免疫组化法检测ASODN转染前后survivin蛋白的表达情况,并将其与顺铂(DDP)和氟脲嘧啶(5-FU)联合应用,观察ASODN与化疗药是否具有协同作用。 结果:Survivin ASODN在终浓度400nmol/L时,对细胞的抑制作用明显,相差显微镜下观察,结肠癌细胞HT-29细胞经ASODN转染后变圆,漂浮,碎片形成,MTT检测ASODN对细胞的抑制率为59.51%,与对照组相比差别有显著性(P<0.05),且6.25料g/耐的DDP或5一Fu与200nmoljL的ASODN联合应J刀,具有协同效应(P<0.05),另外,200nrnol/L的ASODN与小剂量化疗药仍有协同作用。免疫组化检测结果,ASODN转染后survMn蛋白表达下降。流式细胞仪检测结果发现,survivin ASODN转染HT一29细胞后,其细胞凋亡指数(Al)增加,与对照组相比P<0.05。结论:结肠癌细胞系HT一29经survivin反义寡聚核普酸转染后,survivin蛋白表达下降,细胞增殖被抑制,细胞凋亡增加,并且与化疗药具有协同作用。