雪胆素乙对人前列腺癌细胞增殖的抑制作用及其分子机制研究

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目的雪胆素乙(DHCF)是从雪胆属植物中分离获得的葫芦烷型四环三萜类化合物。DHCF具有抗炎和抗肿瘤效应,但其作用机制的研究少见。本研究以人前列腺癌细胞株(LNCaP、DU145、PC3)为研究对象,分析DHCF的抗肿瘤效应,探讨其作用机制。方法MTS法检测细胞增殖状况;PI染色分析细胞周期分布;免疫荧光染色检测细胞骨架变化;Western Blot法检测细胞中特定蛋白的表达。结果MTS结果显示,DHCF以浓度依赖方式抑制LNCaP、DU145、PC3细胞株的增殖,对三种细胞的IC50值分别为5、7、15mol/L。PI染色结果显示,DHCF能使三种细胞的周期阻滞于G2/M期,但只有LNCaP细胞出现明显的凋亡峰。组织免疫荧光染色结果显示,20mol/L的DHCF处理4h后,癌细胞中G-肌动蛋白(actin)表达量减少,肌动蛋白纤丝发生聚集,形成杆状结构;但微管的结构变化不明显。同时,肌动蛋白形成的杆状结构和Cofilin形成的杆状结构呈现共定位,说明这种结构是Cofilin-actin棒。Western Blot结果显示,DHCF引起癌细胞中Cofilin磷酸化水平的明显降低,细胞周期蛋白Cyclin A的表达下调,以及p21Cip1表达量的升高。结论DHCF可有效抑制三种人前列腺癌细胞的增殖,其中LNCaP细胞株发生明显凋亡作用,对DHCF最为敏感。DHCF可能通过诱导肌动蛋白骨架结构聚集和Cofilin-actin棒结构的形成,进而引起细胞周期阻滞,扰乱胞质分裂,从而抑制肿瘤细胞增殖。
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