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目的:1、探索膀胱癌患者尿沉淀细胞中三个肿瘤相关基因启动子CpG岛甲基化谱式异常频率;
2、确立膀胱癌细胞DNA基因启动子高甲基化和表达静息间的关系;
3、评估膀胱癌尿沉淀细胞甲基化分析对膀胱的诊断意义;
方法:根据文献检索和生物信息学分析,采集临床膀胱癌患者术前晨尿50ml,同时收集非膀胱癌患者晨尿50ml作对照,经过离心,细胞裂解,DNA提取,采用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对膀胱癌患者尿沉淀细胞DNA中DAPK,BCL2,和TERT三个基因启动子CpG岛的甲基化状态做了分析,并通过RT-PCR方法对DAPK基因在细胞中的表达状况作了评估。同时与非膀胱癌患者尿沉淀细胞DNA启动子CpG岛甲基化状态作对比。运用SPSS¨5分析、比较各组间数据的差异。
结果:对膀胱癌细胞系中DAPK基因的启动子CpG岛甲基化状态及其表达(mRNAA水平上)的分析确立了高甲基化状态与表达静息化间的相关性。对46例临床确诊的膀胱癌患者和84例非膀胱癌对照的尿沉淀细胞中的DNA甲基化的分析发现,仅Bcl2基因的高甲基化见之于283%(13/46例)的膀胱癌患者(在84例的对照中均为去甲基化的状态)。
结论:膀胱癌患者尿沉淀细胞DNA中DAPK,BCL2,和TERT三个基因启动子CpG岛未见明显甲基化,对于膀胱癌无明显诊断意义,寻找更有信息量的基因是有必要的。膀胱癌细胞DNA基因启动子高甲基化和表达静息问有密切关系。