动脉粥样硬化部位的脂质不断沉积与炎症反应加剧,促进了动脉粥样硬化斑块（Atherosclerotic plaque,AP）形成与破裂,继而可造成致命的心脑血管事件。目前针对AP治疗所用的临床药物多为全身用药以改善血脂异常与AP内炎症反应。但受限于AP封闭的病理环境,全身用药难以使药物在AP内蓄积,因此无法减小或逆转已形成的AP。并且长期全身用药存在着严格的剂量限制与累积毒副作用。针对药物在AP内难以富集和长期用药毒副作用大等临床问题,本课题利用单核细胞对AP特异性趋化的能力和在AP内易泡沫化的特性,设计了一种单核细胞动态分化响应性纳米药物。该纳米药物不仅能够高效“搭乘”单核细胞向AP内迁移,还能感知单核细胞的动态分化并恢复药物活性,从而可望实现对AP的精准治疗。因此,我们将此智能纳米药物称为“纳米旅行者”（Nano-hitchhiker）。研究内容具体包括:1.单核细胞向泡沫细胞分化过程中豆荚蛋白酶（Legumain,Lgmn）表达量的改变利用蛋白质免疫印迹与免疫荧光评估小鼠单核巨噬细胞系（RAW264.7）、人类髓系白血病单核细胞系（THP-1）与小鼠骨髓来源单核细胞（BMDM）向泡沫细胞分化过程中Lgmn表达量的变化。通过免疫组化分析小鼠AP内Lgmn的表达。结果表明,随着单核细胞向泡沫细胞分化,Lgmn的表达量明显增加;泡沫细胞在小鼠AP内大量富集,并表达Lgmn。2.Nano-hitchhiker的合成与表征Nano-hitchhiker通过两步合成:首先,将姜黄素-多肽偶联物和磷脂酰丝氨酸通过共价键和非共价相互作用分别修饰到人血清白蛋白（Human serum albumin,HSA）上;然后,利用两种修饰过后的HSA通过共价键交联的方式制备智能纳米药物,即Nano-hitchhiker。利用高分辨质谱、核磁共振氢谱、透射电镜、动态光散射等手段对其理化性质表征;利用高效液相色谱法评估Nano-hitchhiker的Lgmn响应性药物释放。3.Nano-hitchhiker的细胞摄取及其在动脉粥样硬化斑块内的富集利用流式细胞术,激光共聚焦显微镜评估RAW264.7、THP-1、BMDM细胞对Nano-hitchhiker摄取的能力。通过流式细胞术分析Nano-hitchhiker在小鼠血液中被循环单核细胞摄取的能力。利用小动物荧光成像评估Nano-hitchhiker在AP内的蓄积。结果表明,Nano-hitchhiker可被单核细胞高效特异性摄取,并可随单核细胞在AP内大量蓄积。4.Nano-hitchhiker对动脉粥样硬化斑块的治疗效果与药物毒副作用评估首先,通过小动物超声成像与核磁共振成像对Nano-hitchhiker的治疗效果进行影像学评估。然后,利用油红O染色、免疫荧光评估纳米药物治疗后小鼠AP内脂质沉积和炎症反应。最后,通过小鼠体重监测、药物代谢分析、苏木精-伊红染色、血液生化检测等方法评估Nano-hitchhiker的毒副作用。上述实验结果表明,Nano-hitchhiker可响应于载体单核细胞的分化,有效抑制AP的进展且没有明显的毒副作用。