【摘 要】
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前言 糖尿病的发病率正在逐年增加,我国糖尿病患病率已达3.21%。每年有3.7%的2型糖尿病患者发展为临床糖尿病肾病(DN)。糖尿病肾病的主要病理学改变是肾小球基底膜增厚,细
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前言 糖尿病的发病率正在逐年增加,我国糖尿病患病率已达3.21%。每年有3.7%的2型糖尿病患者发展为临床糖尿病肾病(DN)。糖尿病肾病的主要病理学改变是肾小球基底膜增厚,细胞外基质(ECM)成分堆积。研究糖尿病肾病的发病机制,探索有效延缓甚至逆转其进展的措施具有重要的理论和实践意义。 转化生长因子-β(TGF-β)是一多功能的细胞因子,它的高表达与糖尿病肾病的发生发展密切相关,TGF-β单克隆抗体不但可阻止系膜基质的继续扩张,还可逆转糖尿病肾小球损害,并且此过程是不依赖血糖浓度的。但TGF-β在体内尚有调节细胞增殖、凋亡和免疫抑制等作用,因此必须找到能特异的拮抗TGF-β有害作用的方法。 细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的一个亚族。ERK在肝星状细胞、软骨细胞和肺成纤维细胞中参与了TGF-β1刺激下的细胞外基质形成过程。PD98059可通过抑制ERK上游的MEK1/2活化而特异的阻断ERK通路。我们引入PD98059来研究ERK通路在TGF-β1诱导肾小球系膜细胞ECM分泌中的调控作用,从而进一步探讨糖尿病肾病的发病机制,为进一步治疗选择新的靶点提供理论依据。 材料和方法 采用SD大鼠肾系膜细胞株进行体外培养,3-4天传代一次,亚传代3-8代细胞用于实验。台盼蓝染色法测定不同剂量TGF-β1(0.05-4.0ng/ml)和不同浓度PD98059(10-50umol/l)对细胞的毒性作用。不同浓度的重组人TGF-β1作为刺激剂,PD98059作为抑制剂加入细胞培养液中,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测系膜细胞增殖情况,竞争性酶联免疫
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