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TNFAIP1是一个被鉴定为受肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的蛋白,参与了DNA复制和损伤修复、细胞凋亡、调节细胞骨架结构及某些神经退行性疾病病变过程,如:阿尔兹海默症(AD)。CREB(cAMP response element-binding protein)是一个重要的核转录因子,介导了神经系统内多条信号转导通路,在神经元的生长、发育、凋亡,以及突触可塑性和学习记忆方面有重要调控作用。在本研究中,我们检测了化学药物Forskolin、Genistein、Valproic acid和Polydatin对人神经母细胞瘤细胞系(SKNSH)内TNFAIP1基因表达的影响,发现Forskolin可以显著降低TNFAIP1基因的mRNA水平和启动子活性。而Forskolin是一种腺苷酸环化酶激活剂(Cyclic adenosine monophosphate,cAMP),能激活cAMP-CREB信号通路,因此我们进一步探究了转录因子CREB与TNFAIP1基因的调控关系。KG-501是CREB蛋白的特异性抑制剂,实验证明,它能显著增强SKNSH细胞内TNFAIP1蛋白水平。因此,当过表达外源野生型CREB时,SKNSH细胞内TNFAIP1基因启动子活性和蛋白水平显著降低,说明转录因子CREB能负调控TNFAIP1基因的表达。但是过表达突变型的CREBs133a或KCREB却不能产生类似显著效果,说明CREB的ser133磷酸化和DNA结合域在转录因子CREB调控TNFAIP1基因表达的过程中有重要作用。我们进一步通过生物信息学软件预测是否TNFAIP1基因近端启动子区域内存在CREB结合位点,结果发现在-50和-196处有两个cAMP应答元件(CRE)。将这两个CREs元件进行缺失突变后,CREB对TNFAIP1基因启动子活性的抑制作用明显减弱。并且染色体免疫共沉淀实验(ChIP)也证实,CREB能结合在TNFAIP1基因近端启动子区域-290至-5以内,且包含CREs位点。说明CREB是通过结合在TNFAIP1基因近端启动子区域内的CRE元件上负调控TNFAIP1基因的表达,并且进一步实验表明,CREB蛋白ser133的磷酸化在Forskolin下调TNFAIP1基因表达的过程中是不可缺少的。